2016-03-25
org.kosen.entty.User@64a4053b
정지혜(jungjh0527)
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3T3-L1 preadipocyte 을 키우고 있습니다.
지방세포로 분화하도록 분화유도 성분 (IBMX, DEX, insulin)을 첨가하지 않았음에도 불구하고, control로 보는 cell이 지방세포로 분화가 이루어집니다.
얼려 놓았던 세포가 이미 지방세포로 분화되려고 할 때 넣어둔다면 가능한 일일지, 아니면 세포 분화 유도를 잘 못 시키고 있는 것인지 궁금합니다.
지방세포로 분화하도록 분화유도 성분 (IBMX, DEX, insulin)을 첨가하지 않았음에도 불구하고, control로 보는 cell이 지방세포로 분화가 이루어집니다.
얼려 놓았던 세포가 이미 지방세포로 분화되려고 할 때 넣어둔다면 가능한 일일지, 아니면 세포 분화 유도를 잘 못 시키고 있는 것인지 궁금합니다.
- cell culture
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답변 4
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답변
윤창호님의 답변
2016-03-25- 1
대부분의 분화 가능한 세포들은 분화능력의 유지가 중요합니다.
특히, 분화능을 잃어버리거나 유도를 하지 않았음에도 불구하고 분화가 이루어진다면
Stock을 만들기 전에 관리를 잘못했을 수 도있습니다. - 세포의 관리 (confluence를 100%까지 만들지 않음)가 중요합니다. 또한 culture media의 상태 (낮은 serum 농도등)도 분화를 유도할 수 있는 조건이 되기도 합니다.
세포가 differentiation할 때 proliferation을 STOP하기 때문에 적은 수의 cell을 seeding하여 세포가 증식을 계속하는지 확인해 보시고 실제 지방으로 분화 (oil red O)되었는지 혹은 유전자 레벨에서 분화 유도 전에 지방 세포 마커로 확인 등도 해 볼 수 있겠지만 비교 대상 (정상적으로 잘 분화되는 세포)이 없어 힘들 것 같습니다.
잘못된 세포의 문제점을 찾아 고쳐나가는 것도 중요하고 의미있지만 다른 곳에서 stock을 새로 받아서 비교해 보는 것이 휠씬 수월한 방법일 것 같습니다. -
답변
정지혜님의 답변
2016-03-28- 1
첨부파일
Stock을 새로 받아보았는데도 그런 현상이 또 나왔어서 좀 걱정입니다.
새로 받은 stock도 동일한 기관에서 받은 것이고, phase도 꽤 높아 걱정입니다.
답변 감사합니다. -
답변
윤창호님의 답변
2016-03-31- 1
아직 문제가 해결되지 않아 걱정이 많으실 것 같습니다.
제가 다시 드리고 싶은 이야기는
1. ATCC에 L1 cells에 대한 culture 정보가 잘 나와있습니다. 다시 한번 꼼꼼히 체크해 보시구요.
2. 어떤 serum을 사용하는 지 모르겠지만 calf serum을 사용하는 것이 L1 cells 의 유지에 필수라고 하는 정보도 들은적 있습니다. FBS 자체에 다량의 growth factor 등이 분화를 유도할 수도 있을 것 같습니다.
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답변
정지혜님의 답변
2016-03-31- 1
3T3-L1 미분화 상태 유지에는 calf serum 사용하고 있습니다.
신경써주셔서 다시 답변 달아 주셔서 감사합니다.