2016-04-26
org.kosen.entty.User@29e6acdb
박철선(qkrcjf32620)
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Elastase 저해 활성 실험을 진행중인데요
양성대조군으로는 ursolic acid를 사용하고Tris-HCl buffer를 용매로 사용하는데
Ursolic acid 및 시료들이 버퍼에 녹지 않아 에탄올에 녹여서 사용했는데
침전물이 생기네요 ㅠㅠ
그렇다고 DMSO에 녹이게 되면 제가 알기로 효소의 활성을 DMSO가 저해시킨다고 알고 있는데
어떠한 해결책이 있는지 궁금합니다.
양성대조군으로는 ursolic acid를 사용하고Tris-HCl buffer를 용매로 사용하는데
Ursolic acid 및 시료들이 버퍼에 녹지 않아 에탄올에 녹여서 사용했는데
침전물이 생기네요 ㅠㅠ
그렇다고 DMSO에 녹이게 되면 제가 알기로 효소의 활성을 DMSO가 저해시킨다고 알고 있는데
어떠한 해결책이 있는지 궁금합니다.
- elastase
- 저해
- 침전
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 1
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답변
장성재님의 답변
2016-04-27- 2
관련 논문을 찾아보니 효소의 agglomeration은 DMSO 5%에서 발생하며, EtOH를 사용하여도 20%를 한계로 침전물들이 발생할 수 있습니다. 따라서, 각 시료를 더 높은 농도에서 EtOH에 녹여 stock sol.을 제작 후 사용하여 assay 시의 solvent 농도를 희석하거나, assay에 영향을 받지 않도록 surfactants를 소량 첨가하셔서 시료의 용해도를 높이는 방법을 추천드립니다.
아니면 발색 반응 보다 감도가 높은 형광성 기질을 이용하는 assay법을 사용하시는 것은 어떨까요?
감사합니다 많은 도움이 되었습니다!