2016-04-29
org.kosen.entty.User@fe7c5b5
장미옥(bestwife76)
- 1
식물 유래 유용물질 생산을 위해 유용 물질 생산 경로 내 enzyme activity를 높이고자 합니다.
문헌을 찾아 보니,
이 효소는 MgCl2가 cofactor로 필요하고,
Tris-HCl buffer pH9.0에서 optimal 하다고 되어 있습니다
여기서 질문이요...
식물 세포가 이 효소를 최적으로 생산하여 유용 물질 생산을 최대로 끌어 올리고 싶어서
효소 활성을 최적으로 올리는 조건을 도입해 보고 싶은데요...
MgCl2는 배지에 넣어 준다고 하지만
Tris-HCl buffer pH9.0은 어떻게 구현하면 좋을까요?
일단은 식물 세포가 살아야 하니
buffer에서만 배양해 주는 것은 말이 안되고...
세포 내 어느 정도 완충 조건은 있을 것 같은데, 얼마나 있을지 가늠이 안되고요...
식물 세포가 pH9.0에서 견딜 수 있을 것 같지 않고...
Tris-HCl을 배지에 넣어 주자니 pH가 안 맞고...
어떻게 하는 게 좋을까요?
이런 건 어떤 문헌을 보는 게 좋을까요?
감을 잡을 수가 없어서 아이디어가 없네요
문헌을 찾아 보니,
이 효소는 MgCl2가 cofactor로 필요하고,
Tris-HCl buffer pH9.0에서 optimal 하다고 되어 있습니다
여기서 질문이요...
식물 세포가 이 효소를 최적으로 생산하여 유용 물질 생산을 최대로 끌어 올리고 싶어서
효소 활성을 최적으로 올리는 조건을 도입해 보고 싶은데요...
MgCl2는 배지에 넣어 준다고 하지만
Tris-HCl buffer pH9.0은 어떻게 구현하면 좋을까요?
일단은 식물 세포가 살아야 하니
buffer에서만 배양해 주는 것은 말이 안되고...
세포 내 어느 정도 완충 조건은 있을 것 같은데, 얼마나 있을지 가늠이 안되고요...
식물 세포가 pH9.0에서 견딜 수 있을 것 같지 않고...
Tris-HCl을 배지에 넣어 주자니 pH가 안 맞고...
어떻게 하는 게 좋을까요?
이런 건 어떤 문헌을 보는 게 좋을까요?
감을 잡을 수가 없어서 아이디어가 없네요
- 식물세포배양
- enzyme activity
- Tris-HCl buffer
지식의 출발은 질문, 모든 지식의 완성은 답변!
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
답변 1
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답변
이상후님의 답변
2016-04-29- 3
식물 세포내에서 생산되는 효소는 말 그대로 세포내에서 전사, 번역 과정을 통해 효소가 합성되기 때문에 효소합성과정에는 pH에 문제는 없을 거 같지만, 일단 합성된 효소가 유용물질 생산하는 경로내에서 효소활성도를 높이고자 할때는, 식물세포내에 있는 효소를 crude한 상태로 분리한 후에, 이를 in vitro하에서 기질과 함께 반응시켜(tri-HCL buffer, pH9 조건으로 맞춰진), cofactor인 MgCl2를 넣고, 반응시켜 유용물질을 생산시켜 보시는 것은 어떨런지요.. Tri-HCl buffer/pH 9.0 조건에서 이 효소가 optimal이라는 것은 세포내에서 이효소의 최적 pH는 아닌거 같고, 분리된 효소가 이 버퍼조건에서 최적 pH를 유지하는 것이므로, 식물세포에서 일차적으로 분리하여 이를 유용물질 산물생산에 적용시켜보는 방법이 최선책으로 보입니다.