지식나눔

Ecoli LB broth culture

Ecoli  LB broth culture시 실처럼 기다랗게 하얀 뭉친 것이 관찰 되었습니다 이것이 무엇인지 궁금합니다 그리고 plasmid prep에 관여하는 요소인지도 궁금합니다.
  • Ecoli
  • culture
  • lb broth
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답변 4
  • 답변

    서준배님의 답변

    글로 읽어서는 무엇인지 잘 모르겠습니다.
    이런 문제를 해결하기 위해서는 Ecoli를 키울때 플라즈미드를 넣지 않은 (네거티브 컨트롤) 컬쳐를 함께 키우세요.
    다음 날 네커티브 컨트롤에 무언가가 자랐으면 미디어 문제이고, 네거티브 컨트롤에 아무것도 자라지 않고, 플라즈미드를 넣은 컬쳐에만 자랐으면 그걸 가지고 플라즈미드 프렙을 하시면 될 것 같습니다.
     
    글로 읽어서는 무엇인지 잘 모르겠습니다.
    이런 문제를 해결하기 위해서는 Ecoli를 키울때 플라즈미드를 넣지 않은 (네거티브 컨트롤) 컬쳐를 함께 키우세요.
    다음 날 네커티브 컨트롤에 무언가가 자랐으면 미디어 문제이고, 네거티브 컨트롤에 아무것도 자라지 않고, 플라즈미드를 넣은 컬쳐에만 자랐으면 그걸 가지고 플라즈미드 프렙을 하시면 될 것 같습니다.
     

    공감합니다

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    김동현님의 답변

    가장 좋은 방법은 앞서 말씀하신 것 처럼 아무 것도 첨가하지 않은 컨트롤을 함께 배양하는 것이 가장 좋은 방법 같습니다. 저도 글로 설명을 들으니 확실하게 무엇인지 감이 잘 잡히지가 않네요. 혹시라도 미디엄 성분의 침전물일 수도 있으니 네커티브 컨트롤로 확인해 보는 것이 제일 좋을 것 같습니다. 
    가장 좋은 방법은 앞서 말씀하신 것 처럼 아무 것도 첨가하지 않은 컨트롤을 함께 배양하는 것이 가장 좋은 방법 같습니다. 저도 글로 설명을 들으니 확실하게 무엇인지 감이 잘 잡히지가 않네요. 혹시라도 미디엄 성분의 침전물일 수도 있으니 네커티브 컨트롤로 확인해 보는 것이 제일 좋을 것 같습니다. 
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    장미옥님의 답변

    글만 봐서는 뭔지 정확히는 모르겠습니다만,
    10ul 정도만 샘플링을 해서 광학현미경 100배로 관찰 함 해보시죠..

    E. coli가 워낙 우점하여 자라기 때문에 그런 일은 거의 없는데
    실험실 상황에 따라 곰팡이 오염에 의해 실처럼 나올 수도 있습니다
    LB broth에서 곰팡이 잘 자랍니다

    지금으로부터 약 20여년 전
    이런 일이 있던 경험이 있는데
    그 이후로 실험실 클리닝 하느라
    난리 법석을 피운 적 있습니다 
    글만 봐서는 뭔지 정확히는 모르겠습니다만,
    10ul 정도만 샘플링을 해서 광학현미경 100배로 관찰 함 해보시죠..

    E. coli가 워낙 우점하여 자라기 때문에 그런 일은 거의 없는데
    실험실 상황에 따라 곰팡이 오염에 의해 실처럼 나올 수도 있습니다
    LB broth에서 곰팡이 잘 자랍니다

    지금으로부터 약 20여년 전
    이런 일이 있던 경험이 있는데
    그 이후로 실험실 클리닝 하느라
    난리 법석을 피운 적 있습니다 
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    이호진님의 답변

    lb로 대장균을 키울 때.. 실처럼 뭉치는 현상은 곰팡이 오염에 의한 것일 가능성이 큽니다. 위에 답변하신 분의 의견처럼 이런 일이 생기면 실험실에 있는 모든 실험 기구를 만약을 위해  autoclave 하는 것이 좋습니다. 말씀하신 경우는 대장균이 자라다가 죽어버린 경우라고 봐야 할 것 같아요. 항생제를 제대로 넣지 않았을 때도 가끔 이런 일이 나기도 하지만..  곰팡이 오염 가능성이 무게를 두고 싶습니다. 

     
    lb로 대장균을 키울 때.. 실처럼 뭉치는 현상은 곰팡이 오염에 의한 것일 가능성이 큽니다. 위에 답변하신 분의 의견처럼 이런 일이 생기면 실험실에 있는 모든 실험 기구를 만약을 위해  autoclave 하는 것이 좋습니다. 말씀하신 경우는 대장균이 자라다가 죽어버린 경우라고 봐야 할 것 같아요. 항생제를 제대로 넣지 않았을 때도 가끔 이런 일이 나기도 하지만..  곰팡이 오염 가능성이 무게를 두고 싶습니다. 

     
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