2016-08-18
org.kosen.entty.User@52bfed8b
김성수(zero1521)
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loading을 하려면 최소한의 녹는 solvent로 하여 고르게 펴주는 것이 좋은것인데
제가 로딩하려는 물질은 hexane에 녹지않고 CHCl3에 TLC 스팟이 상대적 잘분리되어 eluent를 클로로폼으로 진행하려합니다.
그런데 문제점은 hexane에 녹지는 않지만 hexane에 TLC 스팟은 움직이고 심지어 CHCl3를 최소한으로 녹여서 로딩하려해도 클로로폼때문에 로딩을 시작하자마자 실리카로 스며듭니다. 이 때문에 먼저 로딩된 물질이 먼저 스며들어 컬럼관에서 나올때면 mixture상태로 나오는 것이 꽤됩니다.
혹시 컬럼을 진행할때 이런 비슷한 경험이나 또는 어떻게 하면 잘되는지 방법아시는 분 좀 알려주세요
저는 지금 최소한으로 녹여서 해도 로딩하기엔 좀 많은 양이라 여러번 나눠서 진행하는 방법도 생각하고 있는데 이보다 좋은 방법좀 부탁드립니다.
제가 로딩하려는 물질은 hexane에 녹지않고 CHCl3에 TLC 스팟이 상대적 잘분리되어 eluent를 클로로폼으로 진행하려합니다.
그런데 문제점은 hexane에 녹지는 않지만 hexane에 TLC 스팟은 움직이고 심지어 CHCl3를 최소한으로 녹여서 로딩하려해도 클로로폼때문에 로딩을 시작하자마자 실리카로 스며듭니다. 이 때문에 먼저 로딩된 물질이 먼저 스며들어 컬럼관에서 나올때면 mixture상태로 나오는 것이 꽤됩니다.
혹시 컬럼을 진행할때 이런 비슷한 경험이나 또는 어떻게 하면 잘되는지 방법아시는 분 좀 알려주세요
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- column
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답변 4
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답변
김동현님의 답변
2016-08-19- 3
혹시 샘플을 실리카에 코팅을 해보셨는지요? 말씀하신 것과 같은 현상이 일어날때 샘플을 실리카에 코팅하여 로딩하면 좋을 것 같다는 생각이 듭니다. 샘플을 잘 녹는 용매에 녹인 후 실리카를 적정비율로 섞어주시고 로터리 증발기를 사용하여 용매를 날려주시면 됩니다. -
답변
양현모님의 답변
2016-08-19- 2
윗분의 solid packing 방법도 나름 괜찮을 듯 합니다. 보통 제 경우에는 안녹는 물질을 그렇게 하면 TLC가 엄청 끌려서 용매를 엄청 받게 되는 경우가 종종 있었습니다.
혹시 화합물 양이 어떨지 모르겠지만
그럴 경우 prep TLC 로 올려보시면 어떨지요? 100 mg 정도의 load 도 가능합니다. 그 이상도~
혹시 모르시면, 간략히 설명 드리면 보통 TLC 판보다 몇 배 두꺼운 TLC 판입니다. 이곳에 클로로 포름으로 완전히 로딩하고 용매 클로로 포름을 완전히 날려 준 후, 큰 챔버에 TLC 판을 넣으면 됩니다. 질문자님 께서 TLC 에서는 분리가 된다고 하셔서 말씀드립니다. 이것 분리능 괜찮습니다.
양현모(yymomo) 2016-08-22yield는 빼내기 나름인 것 같습니다. 하지만 기존 컬럼보다는 수율이 평균적으로 적었습니다.
목적이 분리이신지 아니면 수율이신지에 따라서 이것 저것 생각을 해보셔야 할 듯 합니다.
혹 결정화 작업은 안되시는지요? -
답변
조윤환님의 답변
2016-08-19- 2
질문을 다시 한번 꼼꼼이 읽어 봤습니다.
일반적으로 컬럼을 할 때는 샘플을 녹이는 용매와 팩킹을 하는 용매를 같은 용매로 하는 것이 일반적 입니다. CHCl3로 해도 TLC가 잘 분리된다고 하셨는데, 컬럼에서 분리가 안되고 섞여 나온다면 2가지 정도로 원인을 정리해볼 수 있습니다.
1. 분리하려고 하는 스팟의 Rf값이 너무 큰 경우
2. Overloading된 경우
질문 내용으로 미루어 추측컨데 2번째 경우가 아닌가 싶습니다.
일단 소량으로 분리해보시길 권합니다.
flash column 기준으로 적절한 silica gel 양은 샘플의 25~50배 입니다.
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답변
조윤환님의 답변
2016-08-18- 1
질문 내용으로 추측컨데, 로딩시 문제점은 hexane으로 컬럼을 packing 해놓고 CHCl3에 샘플을 녹여서 loading을 하신게 아닌가 싶습니다.
만약 그런 상황이 아니라면 로딩 샘플이 실리카겔로 스며드는 현상을 이해하기 어렵습니다.
김성수(zero1521) 2016-08-19추측으로 말씀하신게 맞습니다. CHCl3로 녹여서 로딩하면 스며든다는거 정도는 아는데 어느 solvent에 로딩을 하여도 스타팅라인에 있지않고 바로 실리카로 스며들어서 문제가 있네요... 특히 hexane에는 잘 녹지도 않아서 문제가 있고요
말씀하신내용 유튜브로 영상찾아서 본후 해봤는데 처음해본거라 그런지 완벽하게는 못했지만 일부는 분리해냈내요 감사합니다.