2016-11-02
org.kosen.entty.User@73ff0fe
임태중(willow1015)
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알코올 분해능 실험을 준비 하고 있다가 문의 사항이 있어 여쭤 봅니다.
처음 하는 실험인데 논문 METHOD를 보면
ADH 활성에는 NAD+, ALDH 활성에는 NADP+ 를 MATERIAL로 사용하였는데
시약으로는 위 두 형태로 판매 되지 않은거 같아서요.
NADH , NADPH를 어떤 처리를 해야 위 와 같은 형태로 준비가 되는지
알려주시면 감사하겠습니다.
처음 하는 실험인데 논문 METHOD를 보면
ADH 활성에는 NAD+, ALDH 활성에는 NADP+ 를 MATERIAL로 사용하였는데
시약으로는 위 두 형태로 판매 되지 않은거 같아서요.
NADH , NADPH를 어떤 처리를 해야 위 와 같은 형태로 준비가 되는지
알려주시면 감사하겠습니다.
- ADH
- ALDH
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 3
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답변
이상열님의 답변
2016-11-02- 2
아마도 NAD+와 NADP+를 구하시는 것 같은데 Sigma에서 어렵지않게 구매하실 수 있을 겁니다.
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답변
오요한님의 답변
2016-11-03- 2
찾아보니 NAD+/NADH, NADP+/NADPH assay를 할 수 있는 다양한 kit들이 검색됩니다.
이들 kit중 Promega제품 protocol을 첨부합니다.
그런데, 이들 kit에서 사용한 NAD+와 NADP+는 아래 Sigma제품으로 나와 있습니다. (sheet첨부합니다)
NAD+ (http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/n8285?lang=en®ion=US)
NADP+ (http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/n8035?lang=en®ion=US)
저도 이쪽 분야 실험을 해 보지 않아 확실하지는 않지만, 시약명은 NAD, NADP 이지만 아마 reduced form (NADH, NADPH) 가 아닌 form을 NAD+, NADP+로 사용하는 듯 합니다.
물론, NAD, NADP의 oxidized form을 NAD+, NADP+라 부르고, reduced form을 NADH, NADPH로 부르는 것이 맞습니다만, 위 시약 모두 oxidized form이라는 얘기는 없습니다...
하지만 reduced form (NADH, NADPH) 은 따로 판매됩니다.
이런 여러가지 이유로, 위 두 시약을 NAD+, NADP+로 사용이 가능하지 않을까 생각합니다. -
답변
이상열님의 답변
2016-11-03- 2
윗분께서 말씀하신 내용에 첨언을 하자면 언급하신 sigma 제품을 구매하셔서 사용하셔도 되고 그외에 몇가지 더 있는 것으로 알고 있습니다. 그리고 보통 이름으로 Nicotinamide adenine dinucleotide (NAD+)으로 표기하는데 상품에서는 NAD+를 제거하고 그냥 Nicotinamide adenine dinucleotide으로 표기한 것입니다. NADP+도 마찬가지 이유입니다. 그러니 실험에 적당한 것을 구매해서 사용하시면 됩니다.