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지식나눔

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Cloning 시 mRNA에 signal sequence가 존재할 경우

2017-09-22 org.kosen.entty.User@49224a8d 김옥화(kah3173)
  • 2
Cloning을 다 하고 제한효소로 맵핑 다 한다음에 세포에 발현 시킨후 tag 을 확인하려고 하니 계속 발현 확인이 안됐는데 signal sequence가 있는 경우 Er 에서 잘려서 발현이 안 되는 문제가 있습니다. 이런 경우에 cloning primer design을 어떻게해야하나요??
  • Cloning
  • Signal sequence
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답변 2
  • 답변

    임창임님의 답변

    2017-09-27
    • 1
    클로닝 하려는 유전자에 signal sequence가 포함되어 있다고 하셨는데, tag이 signal sequence (N-terminal)쪽에 있어서 확인이 안 된다는 것인지요? tag의 위치를 c-terminal 쪽에 위치시켜 보면 어떨까요. 
     
    답변수정
    클로닝 하려는 유전자에 signal sequence가 포함되어 있다고 하셨는데, tag이 signal sequence (N-terminal)쪽에 있어서 확인이 안 된다는 것인지요? tag의 위치를 c-terminal 쪽에 위치시켜 보면 어떨까요. 
     
    등록된 댓글이 없습니다.
  • 답변

    황규찬님의 답변

    2017-09-28
    • 1
    목적 유전자(서열)을 cloning한후, 확인방법은 RE mapping이 간단하지만 sequencing을 통해 정확한지를 확인해 볼 필요가 있습니다.
    답변수정
    목적 유전자(서열)을 cloning한후, 확인방법은 RE mapping이 간단하지만 sequencing을 통해 정확한지를 확인해 볼 필요가 있습니다.
    김옥화(kah3173) 2017-09-28

    sequencing 으로 제대로 들어간건 확인이 되었지만 WB으로 tag 확인 되지 않았습니다.

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