지식나눔

베타카로틴 이성질체의 분리방법을 알고싶습니다

베타카로틴을 광합성미생물로부터 분리하는 실험을 진행하고 있습니다.

베타카로틴에는 화학구조상 all trans alpha carotene, all trans beta carotene와 함께 이성질체인  9-cis beta carotene 등이 혼재해 있습니다.
이들중에서 9-cis beta carotene만을 순수분리하고 싶은 데 전문가들의 도움을 받고 싶습니다.

이성질제 정제방법관련 논문이나 자료 또는 컬럼레진 등을 소개해주시길 부탁합니다.
 
  • 베타카로틴
  • 이성질체
  • 분리정제
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
답변 2
  • 답변

    조윤환님의 답변

    반갑습니다.

    다음 문헌을 참고하시면 될 것 같습니다.

    Patent EP0666845B1
    http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1080/15216549600201242/pdf
    https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/9239298

    위 문헌의 내용으로 봐선 컬럼분리에 경험이 풍부하고, 농도만 충분히 높다면 분리는 가능할 것 같은데, 분리정제와 관련된 논문이나 특허가 많고, 9-cis beta carotene 가격이 매우 비싼 것으로 봐선 쉽지만은 않은가 봅니다.

    위 논문에 보니 isomerization 하는 방법이 있더군요. 제 생각에는 가격이 저렴한 all trans beta carotene을 isomerization해서 충분한 농도를 얻은 후에 분리하시면 저렴하고 손쉽게 분리가 가능할 것 같습니다.

    단순히 9-cis beta carotene 샘플을 확보할 목적이라면 제안드린 방법을 시도하시고, 다른 목적으로 분리공정을 셋업할 목적이시라면 관련 문헌을 참고하셔서 셋업하시기 바랍니다.
    반갑습니다.

    다음 문헌을 참고하시면 될 것 같습니다.

    Patent EP0666845B1
    http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1080/15216549600201242/pdf
    https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/9239298

    위 문헌의 내용으로 봐선 컬럼분리에 경험이 풍부하고, 농도만 충분히 높다면 분리는 가능할 것 같은데, 분리정제와 관련된 논문이나 특허가 많고, 9-cis beta carotene 가격이 매우 비싼 것으로 봐선 쉽지만은 않은가 봅니다.

    위 논문에 보니 isomerization 하는 방법이 있더군요. 제 생각에는 가격이 저렴한 all trans beta carotene을 isomerization해서 충분한 농도를 얻은 후에 분리하시면 저렴하고 손쉽게 분리가 가능할 것 같습니다.

    단순히 9-cis beta carotene 샘플을 확보할 목적이라면 제안드린 방법을 시도하시고, 다른 목적으로 분리공정을 셋업할 목적이시라면 관련 문헌을 참고하셔서 셋업하시기 바랍니다.


    all trans beta caroten을 isomerization하는 방법은 매우 흥미로운 방법이라고 생각됩니다. 참고로 9-cis beta carotene의 표준품 1mg이 130만원입니다.
    여러목적으로 사용하는 실험을 위해서는 대량으로 정제하고자 하는 방법이 필요하여 시도해보고 있습니다만 본질적으로 화학식이 같은 이성질체이기 때문에 조류내에 9-cis beta carotene을 정제하기 매우 어렵습니다.

    다른 분들도 추가적으로 도움이 되실만한 자료나 정보를 알려주시면 감사하겠습니다.

  • 답변

    조윤환님의 답변

    HPLC컬럼 제조사의 기술문서 인데 관련 내용이 포함되어 있어서 도움이 될 듯 합니다.
    9-cis beta carotene의 표준품 1mg이 130만원이라니 굉장히 비싸군요.
    beta carotene 10g 사서 9-cis beta carotene 100mg만 만들어도 대단하겠는데요.

    문제는 분리에 비용이 많이 들어갈 것이란 사실이죠.
    조류의 경우 all trans와 9-cis의 비율이 거이 유사한 정도라고 하네요.
    그래서 조류에서 분리를 시도하고 있으신듯 합니다.

    요오드를 사용해서 이성질화 하는 방법을 통한 분리 정제와 관련된 부분을 보니 햇빛에 노출시켜서 9-cis 비율을 높이는 방법이네요. semi-conductor를 이용한 광촉매합성반응 경험에 비추어 볼 때 적절한 반응 파장을 잘 찾으면 효율을 극대화할 수 있을 것으로 예상 됩니다.

    대량 정제공정을 셋업 하려면 9-cis의 함량을 극대화한 후에 효과적으로 분리할 수 있는 분리공정을 확보해야 하는데, 분리기법에 경험이 많은 연구원이 필요할 겁니다.

    대량정제 문헌의 경우 silica-gel open column --> ODS open columnprep --> prep-LC  --> recrystallization 순으로 정제했는데, 이분야 기술자라면 누구나 시대해볼 듯한 방법입니다. 이를 보다 저렴한 비용으로 할 수 있는 방법을 찾는다면 더 좋겠죠.

    도움이 되셨길 빕니다.
    HPLC컬럼 제조사의 기술문서 인데 관련 내용이 포함되어 있어서 도움이 될 듯 합니다.
    9-cis beta carotene의 표준품 1mg이 130만원이라니 굉장히 비싸군요.
    beta carotene 10g 사서 9-cis beta carotene 100mg만 만들어도 대단하겠는데요.

    문제는 분리에 비용이 많이 들어갈 것이란 사실이죠.
    조류의 경우 all trans와 9-cis의 비율이 거이 유사한 정도라고 하네요.
    그래서 조류에서 분리를 시도하고 있으신듯 합니다.

    요오드를 사용해서 이성질화 하는 방법을 통한 분리 정제와 관련된 부분을 보니 햇빛에 노출시켜서 9-cis 비율을 높이는 방법이네요. semi-conductor를 이용한 광촉매합성반응 경험에 비추어 볼 때 적절한 반응 파장을 잘 찾으면 효율을 극대화할 수 있을 것으로 예상 됩니다.

    대량 정제공정을 셋업 하려면 9-cis의 함량을 극대화한 후에 효과적으로 분리할 수 있는 분리공정을 확보해야 하는데, 분리기법에 경험이 많은 연구원이 필요할 겁니다.

    대량정제 문헌의 경우 silica-gel open column --> ODS open columnprep --> prep-LC  --> recrystallization 순으로 정제했는데, 이분야 기술자라면 누구나 시대해볼 듯한 방법입니다. 이를 보다 저렴한 비용으로 할 수 있는 방법을 찾는다면 더 좋겠죠.

    도움이 되셨길 빕니다.

    좋은 문헌소개에 대해 감사합니다.

    5 g의 조류를 이용하여 9 batch의 beta carotene을 정제한 결과 순도 약 30%를 확인하였습니다. 9-cis beta carotene의 함량이 약 100mg 수준인데 Sigma 표준 가격으로 계산해보니 1억 3천만원에 해당됩니다. 엄청 비싼물질인거 실감납니다.

    여러가지 정제법이 있지만 두 물질은 isomer로써 거의 동일하기때문에 산업적으로 효과적인 정제방법에 대한 지속적인 연구가 필요한 실정라고 판단됩니다.

    좋은 결과를 기대하며 다시 한번 감사드립니다.