지식나눔

secretome (분비체) 연구 관련 질문입니다.

줄기세포 분비체에 의한 therapeutic potential에 관심이 있어 실험 구상중입니다.
그 분비체가 신경세포나 아교세포가 자극을 받았을때 어떤 역할을 하는지 찾아보고자 하는데요.
가장 중요한 분비체의 성분을 proteomics (or ELISA)를 이용하여 분석하면 좋겠지만 힘든 상황입니다. 세포 상층액 (serum free)을 가지고 분석가능한 방법이 뭐가 있을까요 . 그 분비체의 성분의 특징을 알아야 실험 방향을 잡을수 있을거 같은데요.

ps: 줄기세포라고 보고가 되어있지만 facs분석을 해본 결과 %가 그리 높지 않습니다. 저는 neuroprotective effect를 예상합니다. 너무 두리뭉실하게 질문을 드려서 죄송합니다. 돈이 저를 힘들게 하네요....ㅡㅡ;;;;;;

 
  • stem cell
  • secretome
  • regeneration
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답변 2
  • 답변

    박진성님의 답변

    secretome 의 성분을 분석하고자 하는지, effect를 분석하고자 하는지에 따라 다릅니다.
    secretome의 성분을 분석하고자 한다면 proteomics를 해야하는데, 아시는대로 비용이 만만치 않죠.
    neuroprotective effect를 예상한다고 하셨으니, in vitro effect를 볼 수 있는 실험을 바로 해볼 수 있을 것 같습니다.
    예를 들면, 신경세포를 plating하고, media에 secretome농축액 있는 것 없는것을 넣어주고 과산화 수소(다양한 in vitro injury모델이 있죠. inflammatory cytokines, high glucose media..)등으로 damage를 준 후 viable cell을 체크하는 단순한 방법부터 시작하실 수 있을 것 같네요.
    그 외에도 할 수 있는 실험이 매우 다양한데, 질문하신 분의 분야를 구체적으로 알려주시면 더 구체적인 대답을 해드릴 수 있을 것 같아요.
    secretome 의 성분을 분석하고자 하는지, effect를 분석하고자 하는지에 따라 다릅니다.
    secretome의 성분을 분석하고자 한다면 proteomics를 해야하는데, 아시는대로 비용이 만만치 않죠.
    neuroprotective effect를 예상한다고 하셨으니, in vitro effect를 볼 수 있는 실험을 바로 해볼 수 있을 것 같습니다.
    예를 들면, 신경세포를 plating하고, media에 secretome농축액 있는 것 없는것을 넣어주고 과산화 수소(다양한 in vitro injury모델이 있죠. inflammatory cytokines, high glucose media..)등으로 damage를 준 후 viable cell을 체크하는 단순한 방법부터 시작하실 수 있을 것 같네요.
    그 외에도 할 수 있는 실험이 매우 다양한데, 질문하신 분의 분야를 구체적으로 알려주시면 더 구체적인 대답을 해드릴 수 있을 것 같아요.
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  • 답변

    김형택님의 답변

    제가 실험을 한다면 신경세포나 아교세포를 transwell에 배양을 하고 자극할 수 있는 Aβ나  lipopolysaccharide로 반응을 시킨 다음에 stem cell의 neuroprotective effect를 확인하기 위해 MTT assay나 CCK assay를 이용해서 cell viability를 보고 효과가 있으면 anti-inflammatory cytokines을 확인하는 것 부터 할 것 같습니다.
    제가 실험을 한다면 신경세포나 아교세포를 transwell에 배양을 하고 자극할 수 있는 Aβ나  lipopolysaccharide로 반응을 시킨 다음에 stem cell의 neuroprotective effect를 확인하기 위해 MTT assay나 CCK assay를 이용해서 cell viability를 보고 효과가 있으면 anti-inflammatory cytokines을 확인하는 것 부터 할 것 같습니다.
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