2018-10-10
org.kosen.entty.User@45e5d886
김상윤(yoon1009)
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E. coli. 에서 단백질 생산 시 endotoxin 의 농도가 약 2000 eu/mg 정도로 높게 나오며, 제거가 잘 되지 않습니다.
1. 이렇게 endotoxin level이 높은 단백질을 mouse 피부에 도포하거나 sc injection(10~100 ug/mouse) 할 경우 피부 or 전신에 inflammation 등의 부작용이 발생하나요?
혹시 실험 경험이 있으신 분들의 조언을 부탁 드립니다.
2. 단백질 정제 후 triton X100 or X114로 endotoxin 제거를 시도해 봤으나 endotoxin 제거가 잘 되지 않습니다. 박테리아에서 단백질 생산 후 endotoxin 제거 노하우가 있으신 분들의 도움을 요청 합니다.
1. 이렇게 endotoxin level이 높은 단백질을 mouse 피부에 도포하거나 sc injection(10~100 ug/mouse) 할 경우 피부 or 전신에 inflammation 등의 부작용이 발생하나요?
혹시 실험 경험이 있으신 분들의 조언을 부탁 드립니다.
2. 단백질 정제 후 triton X100 or X114로 endotoxin 제거를 시도해 봤으나 endotoxin 제거가 잘 되지 않습니다. 박테리아에서 단백질 생산 후 endotoxin 제거 노하우가 있으신 분들의 도움을 요청 합니다.
- Endotoxin
- inflammation
- sc injection
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 4
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답변
변경필님의 답변
2018-10-10- 5
간략하게 답변 드립니다.
1. 동물 시험시 endotoxin 에 의한 영향
: 말씀하신대로 하시고자 하는 시험의 목적과 상관 없이 동물 시험에서 부반응(부작용) 등이 발생합니다.
2. endotoxin 제거 관련
: 제대로 endotoxin를 제거를 할려면 ion exchange column를 사용하여 제거 하셔야 합니다.
세팅은 분리하고자하는 단백질 특성에 맞게 하시면 됩니다.
키워드( endotoxin remover, ion exchage)로 검색 하시면 많은 정보를 찾을수 있을 것입니다.
즐거운 하루 되세요. -
답변
김영일님의 답변
2018-10-10- 5
Endotoxin은 그람음성균에서 유래되는 발열성물질입니다.
Endotoxin의 제거는 가온하에 <Active carbon, activated carbon, activated charcoal, 활성탄>에 흡착시켜 제거해 보십시요. -
답변
장미옥님의 답변
2018-10-12- 1
이런 내용이 있네요
혹시 도움이 되시려나 해서 첨부해 봅니다
부디 도움이 되시기를 바랍니다 -
답변
성학모님의 답변
2018-12-10- 0
Endotoxind은 혈액내 오염될 경우 혈액응고를 유발합니다. 상세하게 설명하자면 내인성응고기전에 따라 12인자가 음전하를 가진 endotoxin, collagen에 의해 활성화되면서 10인자까지 활성화되면 트롬빈이 생성되어 피브리노겐을 피브린으로 전환시킴으로써 혈액응고가 발생됩니다.
폐혈증을 유발하는 Stapylococcus aureus와 같은 균들은 혈액내 존재시 증식하는 가운데 endotoxin을 다량 생성하므로 혈액이 응고되어 사망에 이르게 됩니다.
따라서 주사제 의약품에서는 무균과 함께 중요하게 다루는 것이 엔도톡신입니다. 일정수준이하임을 증명해야하는 데 대장균과 같이 엔도톡신이 많은 균주로 부터 생산하는 경우 더 엄격한 관리기준을 따르기 때문에 실제 생산에서는 신중한 선택이 필요합니다.