지식나눔

pichia에서 재조합 단백질 정제시 색소 분리

pichia에서 유용 단백질을 생산하는 일을 하고 있습니다.
그런데, 여러 정제 방법을 해봐도 pichia 색소가 target 단백질과 같이 분리 됩니다.
혹시 단백질의 활성에 영향을 미치지 않고 색소를 제거 할 수 있는 방법이 있는지요...?

 
  • pichia
  • 단백질
지식의 출발은 질문, 모든 지식의 완성은 답변! 
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
답변 1
  • 답변

    변경필님의 답변

    경험을 바탕으로 말씀을 드립니다.
    host cell의 종류와 상관 없이 단백질에 색이 침착되는 경우
    대부분의 사용하시는 배지 성분에 의해 기인 합니다.
    배지성분의 어떠한 물질이 단백질과 결합하여 보여지는 것이기 때문에 정제로 제거를 할 수는 없습니다.
    사용하는 배지에서 영향을 끼치는 물질을 찾아서 제외하여 배지를 제조하시거나, 해당물질이 없는 배지를 구입해서 사용하셔야 합니다.
    예) 비타민류
    동일 제품으로 배양 했을대 이전에는 색 침착이 관찰 되지 않았는데, 이번에 보인다면 동일한 배지라도 보관상에 문제로 인하여 배지내 성분이 변화하여 단백질과 결합 할 수도 있습니다.
    예) 배지 보관시 빛 차단 등..

    참고 하시길 바랍니다.

     
    경험을 바탕으로 말씀을 드립니다.
    host cell의 종류와 상관 없이 단백질에 색이 침착되는 경우
    대부분의 사용하시는 배지 성분에 의해 기인 합니다.
    배지성분의 어떠한 물질이 단백질과 결합하여 보여지는 것이기 때문에 정제로 제거를 할 수는 없습니다.
    사용하는 배지에서 영향을 끼치는 물질을 찾아서 제외하여 배지를 제조하시거나, 해당물질이 없는 배지를 구입해서 사용하셔야 합니다.
    예) 비타민류
    동일 제품으로 배양 했을대 이전에는 색 침착이 관찰 되지 않았는데, 이번에 보인다면 동일한 배지라도 보관상에 문제로 인하여 배지내 성분이 변화하여 단백질과 결합 할 수도 있습니다.
    예) 배지 보관시 빛 차단 등..

    참고 하시길 바랍니다.

     
    등록된 댓글이 없습니다.