지식나눔

PBMC cytotoxicity

PBMC cytotoxicity를 K562와 LDH assay로 하고있습니다만 좀도 좋은 안정적인 방법이 있으면 조언받고 싶습니다. 값에 대한 신뢰성이 현장에서 확보되지않아 고민입니다. 랩온어칩 뭐 이런 방법적 전환은 현재 없겠는지요? 감사합니다. 
  • 세포독성
  • NK
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답변 5
  • 답변

    한민준님의 답변

    사람 혈액에서 추출한 PBMC를 말하는 것인가요? 보통 cytotoxicity assay로 MTT나 WST-1 (개인적으로 이 assay를 더 선호합니다..washing step이 없어서 오차도 적고 실험이 간편해서요..)를 사용하는데요.. LDH assay를 해야 하는 이유가 있을까요? 그리고 K562는 cell line인가요? 이것이 control인가요? media 조성과 supplement가 다를 텐데 control로 사용할수 있을지 잘 모르겠습니다. 
    사람 혈액에서 추출한 PBMC를 말하는 것인가요? 보통 cytotoxicity assay로 MTT나 WST-1 (개인적으로 이 assay를 더 선호합니다..washing step이 없어서 오차도 적고 실험이 간편해서요..)를 사용하는데요.. LDH assay를 해야 하는 이유가 있을까요? 그리고 K562는 cell line인가요? 이것이 control인가요? media 조성과 supplement가 다를 텐데 control로 사용할수 있을지 잘 모르겠습니다. 

    감사합니다. 역발상으로 살아남은 셀을 재보는것도 LDH cytotoxicity 해결안이 될수있겠군요.

  • 답변

    김형택님의 답변

    저도 이전에는 MTT assay를 이용하다가 최근에는 독성이 없는 CCK8를 이용해서 Cytotoxicity를 측정하고 있습니다.
    인터넷을 검색해보니 PBMC cytotoxicity와 관련된 celligo에서 나온 장비가 있어서 참고하시라고 첨부해 드립니다.
    저도 이전에는 MTT assay를 이용하다가 최근에는 독성이 없는 CCK8를 이용해서 Cytotoxicity를 측정하고 있습니다.
    인터넷을 검색해보니 PBMC cytotoxicity와 관련된 celligo에서 나온 장비가 있어서 참고하시라고 첨부해 드립니다.

    감사합니다.

  • 답변

    심우영님의 답변

    Alamar blue assay 추천.
    흡광도와 형광을 동시에 볼 수 있는데 좀 민감하게 볼려면 형광으로 해서 보는게 좋은 결과를 얻었습니다.
    Alamar blue assay 추천.
    흡광도와 형광을 동시에 볼 수 있는데 좀 민감하게 볼려면 형광으로 해서 보는게 좋은 결과를 얻었습니다.

    감사합니다.

  • 답변

    손영옥님의 답변

    간단한 세포 독성은 MTT나 WST 방법으로 하면 아무 문제 없습니다.
    간단한 실험을 굳이 어렵게 하실 필요는 없을 듯합니다.
    신뢰성은 아마 실험하실때 세포 농도를 가능한 같게 하는게 오차를 줄일수 있는 방법이겠고
    디쉬에 부탁 정도가 약하면 워시아숫 스템이 없은 Assay로 하시는게 반복 실험간 오차를 줄일수 있는 방법같습니다.
    간단한 세포 독성은 MTT나 WST 방법으로 하면 아무 문제 없습니다.
    간단한 실험을 굳이 어렵게 하실 필요는 없을 듯합니다.
    신뢰성은 아마 실험하실때 세포 농도를 가능한 같게 하는게 오차를 줄일수 있는 방법이겠고
    디쉬에 부탁 정도가 약하면 워시아숫 스템이 없은 Assay로 하시는게 반복 실험간 오차를 줄일수 있는 방법같습니다.

    감사합니다.

  • 답변

    장성재님의 답변

    질문자께서 원하시는 PBMC cytotoxicity 측정 방법은 현재 K562가 정답입니다.

    다양한 회사에서 키트를 판매하고 있으니 가장 효율적인 것을 선택해서 사용하세요.
     
    질문자께서 원하시는 PBMC cytotoxicity 측정 방법은 현재 K562가 정답입니다.

    다양한 회사에서 키트를 판매하고 있으니 가장 효율적인 것을 선택해서 사용하세요.
     
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