지식나눔

배지 스탁 조제 시, 초순수가 아닌 순수 사용 가능???

식물세포배양을 하고 있는 1인 입니다
학위과정부터 쭈~~~욱 배지를 조제하기 위한 스탁(최소 15가지 이상의 시약들을 매 번 무게를 달아 넣지 않고 2~3가지씩 스탁으로 만들어 냉장 보관 후 스탁을 희석해서 사용)을 만들어 보관 후 배지를 조제했었는데요

아무 생각없이
스탁을 조제할 때는 초순수를 사용했더랬죠
물이 깨끗하지 않으면
이온들과 스탁 내 첨가되는 시약들이 반응을 할 거야
라는 아주 애매~~~한 생각 때문에요
그 누구에게도 정확하게 배워 본 적이 없기도 했고요

그런데, 문득,
스탁 조제 시, 왜 굳이 초순수를 사용해야 하나?
순수를 사용할 수는 없는 것인가?
대신 교체 주기를 2주~4주 이내로 제한하면
이온들끼리 반응하는 것을 줄일 수 있지 않을까? 라는
역시 애매~~~한 생각이 들었습니다

저의 이런 생각들을 뒷받침할만한 근거 내지는
그거 잘못된 거야
스탁은 초순수로 조제해야 돼 라는 근거가 될만한 문헌
뭐 이런 것들이 있다면
또는 그런 정보들을 알고 계시다면
공유 부탁드립니다

감사합니다~~~
  • 배지 스탁 조제
  • 초순수
  • 순수
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
답변 6
  • 답변

    조윤환님의 답변

    고정관념에 대한 물음표를 보고나니 호기심이 생기네요.
    과연 그걸까?.

    사실 순수나 초순수에 대해선 분야마다 그 개념이 조금씩 다르다고 알고 있습니다. 
    각자 관심사가 다르기 때문일겁니다.

    저는 증류수, DI water 정도의 개념으로 생각하죠. 요즘 같이 성능 좋은 초순수제조 장치가 일반화되기 이전에 화학을 배워서 그럴까요? 

    저는 배지에 대해서는 잘 모릅니다만 미생물을 키우는 환경을 제공하고, 실험의 설계 의도를 외곡할만한 요소들은 배제 되어야 하므로 좋은 품질의 물을 써야 한다고 생각 합니다. 그렇지만 어느 정도가 목적에 합당한 좋은 물이냐는 것이 선생님의 의문점이겠죠.

    배지 만드는 과정을 보면 배지 자체가 거의 물이라고 봐도 될 것 같더군요. 이것만 봐도 물이 실험에 미치는 영향은 짐작이 가능하겠더군요.

    저는 이런 궁금증이 생기면 논문 보다는 기술표준을 찾아보는 편입니다. 표준이라는 것이 한번 잘못 만들어지면 산업에 미치는 파급효과가 어머어마하기 때문에 관련전문가들의 엄청난 검증을 거치게 마련이니 신뢰도가 높다고 생각해섭니다.

    배지와 관련해선 ISO 11133 이라는 기술표준이 있더군요. 이 표준에 보면 물은 0.3 M옴.cm 이상을 권장하고 있습니다. 선생님께서 언급하신 순수가 이 기준을 만족한다면 충분히 사용 가능하다고 생각 합니다.
    고정관념에 대한 물음표를 보고나니 호기심이 생기네요.
    과연 그걸까?.

    사실 순수나 초순수에 대해선 분야마다 그 개념이 조금씩 다르다고 알고 있습니다. 
    각자 관심사가 다르기 때문일겁니다.

    저는 증류수, DI water 정도의 개념으로 생각하죠. 요즘 같이 성능 좋은 초순수제조 장치가 일반화되기 이전에 화학을 배워서 그럴까요? 

    저는 배지에 대해서는 잘 모릅니다만 미생물을 키우는 환경을 제공하고, 실험의 설계 의도를 외곡할만한 요소들은 배제 되어야 하므로 좋은 품질의 물을 써야 한다고 생각 합니다. 그렇지만 어느 정도가 목적에 합당한 좋은 물이냐는 것이 선생님의 의문점이겠죠.

    배지 만드는 과정을 보면 배지 자체가 거의 물이라고 봐도 될 것 같더군요. 이것만 봐도 물이 실험에 미치는 영향은 짐작이 가능하겠더군요.

    저는 이런 궁금증이 생기면 논문 보다는 기술표준을 찾아보는 편입니다. 표준이라는 것이 한번 잘못 만들어지면 산업에 미치는 파급효과가 어머어마하기 때문에 관련전문가들의 엄청난 검증을 거치게 마련이니 신뢰도가 높다고 생각해섭니다.

    배지와 관련해선 ISO 11133 이라는 기술표준이 있더군요. 이 표준에 보면 물은 0.3 M옴.cm 이상을 권장하고 있습니다. 선생님께서 언급하신 순수가 이 기준을 만족한다면 충분히 사용 가능하다고 생각 합니다.
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    손영옥님의 답변

    초순수로 스탁을 만들어 놓고 희석하여 배지를 만드셨다고 하는데 희석할때 순수로 희석하여 배지를 만들어 지금까지 실험하셨다면....스탁도 순수로 만들어 사용하셔도 큰 문제는 없을 것 같습니다.
    초순수로 스탁을 만들어 놓고 희석하여 배지를 만드셨다고 하는데 희석할때 순수로 희석하여 배지를 만들어 지금까지 실험하셨다면....스탁도 순수로 만들어 사용하셔도 큰 문제는 없을 것 같습니다.
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    김영일님의 답변

    먼약에 syock medium을 초순수로 조제하였다면 working medium조제에도
    초순수를 사용하여야 실험에 타당성이 롹보된다고 생각합니다.
    순수는 탈이온수를 증류하여 탈염한  증류소로 식물세포배양에 별영향을 미치지
    않을 것으로 사료되므로, 구태여 고가의 초순수를 사용할 필요가 없ㄷ고 생각합니다.

    Stock medium 및 Working medium 모두 순수인증류수로 조제하여 사용하여도
    배양에 지장이 없을 것으로 판단되니다.
    먼약에 syock medium을 초순수로 조제하였다면 working medium조제에도
    초순수를 사용하여야 실험에 타당성이 롹보된다고 생각합니다.
    순수는 탈이온수를 증류하여 탈염한  증류소로 식물세포배양에 별영향을 미치지
    않을 것으로 사료되므로, 구태여 고가의 초순수를 사용할 필요가 없ㄷ고 생각합니다.

    Stock medium 및 Working medium 모두 순수인증류수로 조제하여 사용하여도
    배양에 지장이 없을 것으로 판단되니다.
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    장성재님의 답변

    배지 성분 중 물에 대한 내용인데, 초순수와 순수, 수돗물, 모두 세포 배양에 사용 가능합니다.
    단, 세포의 성장 또는 대사산물 등의 생산에 지장이 없어야 하지요.
    과거 30년 전에는 1차 증류수로도 동물세포 배양이 가능했습니다. 왜나하면 초순수 만드는 장치가 없었으니까요...너무 비싸서....

    까다로운 생산 조건을 가진 또는 그 생산 조건을 셋팅하려면 배지 성분 중 미량 성분의 조절이 필요하니 보다 순도가 높은 다른 성분이 없는 초순수를 사용한 거죠.

    목적이 무엇인지 다시 한번 생각해보세요.
    배지 성분 중 물에 대한 내용인데, 초순수와 순수, 수돗물, 모두 세포 배양에 사용 가능합니다.
    단, 세포의 성장 또는 대사산물 등의 생산에 지장이 없어야 하지요.
    과거 30년 전에는 1차 증류수로도 동물세포 배양이 가능했습니다. 왜나하면 초순수 만드는 장치가 없었으니까요...너무 비싸서....

    까다로운 생산 조건을 가진 또는 그 생산 조건을 셋팅하려면 배지 성분 중 미량 성분의 조절이 필요하니 보다 순도가 높은 다른 성분이 없는 초순수를 사용한 거죠.

    목적이 무엇인지 다시 한번 생각해보세요.
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    심우영님의 답변

    동물 세포의 경우 FBS등 여러가지 물질들이 혼합되기 때문에 세포 성장에 요소로 작용할 확률이 크기 때문에 초순수를 사용하는 것이 안심이 되는 부분이 있습니다.
    하지만, 식물 세포의 경우 FBS처럼 복합적인 물질의 사용이 제한적이고 상대적으로 단순한 조합을 쓰기 때문에 순수를 써도 크게 문제가 없었다고 판단됩니다.
    (식물세포의 배지가 단순하다는 의미가 아니라 동물세포의 배지보다는 잘 정의되어 있다는 의미입니다.)
    동물 세포의 경우 FBS등 여러가지 물질들이 혼합되기 때문에 세포 성장에 요소로 작용할 확률이 크기 때문에 초순수를 사용하는 것이 안심이 되는 부분이 있습니다.
    하지만, 식물 세포의 경우 FBS처럼 복합적인 물질의 사용이 제한적이고 상대적으로 단순한 조합을 쓰기 때문에 순수를 써도 크게 문제가 없었다고 판단됩니다.
    (식물세포의 배지가 단순하다는 의미가 아니라 동물세포의 배지보다는 잘 정의되어 있다는 의미입니다.)
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    하영술님의 답변

    Labogene 회사에서 소개한 water purification system product guide입니다.
    참고하시면 좋을 것 같네요...

     
    Labogene 회사에서 소개한 water purification system product guide입니다.
    참고하시면 좋을 것 같네요...

     
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