2019-06-20
org.kosen.entty.User@7372e02c
장미옥(bestwife76)
- 3
식물세포를 플라스크 현탁배양하고 있습니다
이차 대사산물 생산이 목적이므로
특정 elicitor를 처리하게 되면 세포의 생존율이 감소하면서
이차 대사산물이 생산되는 것이 일반적이지요
그런데,
최근 실험에서
특정 elicitor를 처리했음에도 agitation 방식의 플라스크 배양에서는
세포의 생존율이 감소하지 않았습니다
물리적인 스트레스 강도가 낮으니까 이런 현상이 있나 하는 생각이 들어서
물리적인 스트레스 강도를 높여보고자 합니다
1. rpm을 높여본다
2. 최종 부피를 낮추어서 세포로 하여금 교반 속도가 빠른 것처럼 느끼게 해준다
3. 세포 접종량을 적게 하여 특정 부피, 특정 교반 속도 내에서 좀 더 빠르게 교반되게 하거나 적은 세포양에 의해 더 많은 스트레스를 받도록 해준다
이 외에 어떤 방법이 있을까요?
혹은 위의 방법들 중 어떤 방법이 더 효과적일까요?
이론적인 설명과 함께 답변 부탁드립니다
이차 대사산물 생산이 목적이므로
특정 elicitor를 처리하게 되면 세포의 생존율이 감소하면서
이차 대사산물이 생산되는 것이 일반적이지요
그런데,
최근 실험에서
특정 elicitor를 처리했음에도 agitation 방식의 플라스크 배양에서는
세포의 생존율이 감소하지 않았습니다
물리적인 스트레스 강도가 낮으니까 이런 현상이 있나 하는 생각이 들어서
물리적인 스트레스 강도를 높여보고자 합니다
1. rpm을 높여본다
2. 최종 부피를 낮추어서 세포로 하여금 교반 속도가 빠른 것처럼 느끼게 해준다
3. 세포 접종량을 적게 하여 특정 부피, 특정 교반 속도 내에서 좀 더 빠르게 교반되게 하거나 적은 세포양에 의해 더 많은 스트레스를 받도록 해준다
이 외에 어떤 방법이 있을까요?
혹은 위의 방법들 중 어떤 방법이 더 효과적일까요?
이론적인 설명과 함께 답변 부탁드립니다
- 플라스크 배양
- agitation
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 3
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답변
김영일님의 답변
2019-06-24- 3
우선 배양시 agitation방식을 교반기을 이요하였느지, 혹은 shaking방식으로 배양하였는지가
궁금합니다.
배양방식을 검투해 보시고,
1. 일정교반속도(rpm)에서 elicitor의 농도에 따른 세포사멸의 kinetics을 구하고
2. 일정농도의 elicitor를 처리하여 교반속도에 따른 세포사멸의 kinetics
3. 교반방식에 있어 프로펠러식 혹은 자석봉식으로 배양하느냐도 검토하시어
최적의 elicitor농도와 교반속도를 찾도록 하시면 2차산물 생성에 도움이 되리라 생각합니다.
www.us.yahoo.com에서 <Agitation effect to the second metabolites products in the flask
plant cell culture>을 search하면 많은 정보가 있으며,
써모피서사이언티픽스 코리아(주) 02-2023-0600에 문의하시면 도움을 받을 수 있으리라
생각합니다. -
답변
이상후님의 답변
2019-06-26- 1
위에서 설명하신 방법외에 물리적인 스트레스를 유발시키는 추가 방법으로는,
1. aeration 정도를 조절(호기적 배양 조건일 경우, 통성혐기성 또는 기타 방법 등)
2. osmotic stree 유발(염 농도을 표준 배양 조건보다 약간 높게 유지시키는 방법 등)
3. Nutrient 결핍 조건(Carbon source 제한 조건 등)
등이 있겠습니다.
-
답변
장성재님의 답변
2019-07-10- 0
위 두분이 말씀해주신 방법과 작성자께서 언급하신 3가지 방법 모두 타당할 수 있다고 생각되는 데, 우선 어떤 물리적 자극에 배양하시는 식물세포가 반응하는 지를 먼저 파악하셔야 할 것 같네요.
단순한 기계적 자극이라면 bead를 넣고 배양할 수도 있어요~^^
빨리 생산 최적 조건을 잡으셔야 할 듯.