지식나눔

염색을 위한 뇌조직 준비 (Frozen section)

생쥐 뇌조직 샘플을 이용하여 cell body, soma, perikaryon등의 신경 구조를 보기위해 GOLGI 염색 실험을 진행중입니다. 카메라 기능을 이용한 FD Rapid GolgiStain™ Kit를 이용해서 첫번째 뇌샘플은 150마이크로 미터로 section해서 해마영역에서 axon과 dentrite를 살펴보았는데요. 뇌 조직 슬라이스가 두꺼워서 이미지용 슬라이드 갯수도 너무 적고 원하는 이미지를 얻기가 상당히 어렵습니다. 여기서 조언을 얻고 싶은 부분은 라이카 마이크로톰을 이용해서 조직 섹션 후 바로 젤라틴 코팅 슬라이드에 바로바로 붙이는데요 조직을 50마이크로로 섹션후 슬라이드로 붙일때 조직이 말려버리고 손상이 너무 많이 나서 실험용 데이터로 사용을 못할거 같습니다. 뇌 조직 붙이는 방법에 대해 경험자분의 조언 부탁드립니다. (일반 IHC 방법은 20마이크로미터로 섹션해서 storage solution에 보관하여 슬라이드에 붙여서 진행하는데 문제없었습니다)


 
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  • spine
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답변 1
  • 답변

    심우영님의 답변

    혹시 Frozen section이신지요?
    부위는 약간 다르지만 저도 마우스 뇌 가지고 실험할 때 그런 문제가 많아서 paraffin section으로 바꿔서 진행했습니다.
    paraffin section은 그래도 냉동보다는 덜 말리니깐 한번 시도해 보심이...

    저 같은 경우에 Frozen section하면서 샘플이 말리는 요인은 2가지가 있었습니다.
    1.두께가 너무 얇은 경우
    2. 옮길 때 마이크로톰이나 슬라이드, 혹은 옮기는 도구(저는 붓을 썼습니다.) 심지어는 내 손의 온도가 높다보니 얼려진 샘플이 녹아 순간 말리는 경우..

    병원이나 학교등에 병리 실험을 대신 해주는 곳이 있습니다.(외부 의뢰 가능)
    해마영역이면 많은 양이 나오지는 않을테니 샘플 값 vs 의뢰비 생각하면 의뢰하는게 나을 수도 있습니다.
     
    혹시 Frozen section이신지요?
    부위는 약간 다르지만 저도 마우스 뇌 가지고 실험할 때 그런 문제가 많아서 paraffin section으로 바꿔서 진행했습니다.
    paraffin section은 그래도 냉동보다는 덜 말리니깐 한번 시도해 보심이...

    저 같은 경우에 Frozen section하면서 샘플이 말리는 요인은 2가지가 있었습니다.
    1.두께가 너무 얇은 경우
    2. 옮길 때 마이크로톰이나 슬라이드, 혹은 옮기는 도구(저는 붓을 썼습니다.) 심지어는 내 손의 온도가 높다보니 얼려진 샘플이 녹아 순간 말리는 경우..

    병원이나 학교등에 병리 실험을 대신 해주는 곳이 있습니다.(외부 의뢰 가능)
    해마영역이면 많은 양이 나오지는 않을테니 샘플 값 vs 의뢰비 생각하면 의뢰하는게 나을 수도 있습니다.
     
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