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HPLC 이동상용매 제조 순상, 역상

HPLC를 사용한지 얼마 되지 않았는데 전공적으로 부족해서 이동상용매를 제조할때 순상인지 역상인지 구분하는게 어렵습니다. 그에따라 컬럼도 따로 쓰는걸로 알고있어서 정확하게 구분해야하는데.. 제가 알기론 이동상용매가 순상이비극성용매 역상에 극성용매? 로 만들어 지는건가요? 극성비극성은 그냥 물로 구분하면될까요 이동상용매 제조 안에 물의 비율이 크면 역상 적으면 순상 이렇게 구분해도 될까요? 자세한 설명 부탁드립니다 감사합니다!
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답변 3
  • 답변

    이상후님의 답변

    1. 순상
      - 컬럼: 극성 컬럼(SiOH, NH2, -CN group 등이 표면에 작용기로 작용)
      - 이동상: hexane, isooctane 같은 비극성 용매 사용
      - 순상 컬럼 사용시, 물과 같은 극성 물질을 사용하게 되면 분리하고자 하는 물질과 충전물질과의 강한 수소결합으로 인해 tailing 현상으로 물질 분리가 어려울 수 있음

    2. 역상
       - 컬럼: Silica 표면에 C18(Octadecyl)나 C8(Octyl) 같은 비극성 작용기 결합된 구조t
       - 이동상: 물:ACN 또는 물:methanol 같은 극성 용매 사용
       - 역상 컬럼 사용시에는 극성물질은 빨리 용출되고 비극성물질은 늦게 용출됨
    1. 순상
      - 컬럼: 극성 컬럼(SiOH, NH2, -CN group 등이 표면에 작용기로 작용)
      - 이동상: hexane, isooctane 같은 비극성 용매 사용
      - 순상 컬럼 사용시, 물과 같은 극성 물질을 사용하게 되면 분리하고자 하는 물질과 충전물질과의 강한 수소결합으로 인해 tailing 현상으로 물질 분리가 어려울 수 있음

    2. 역상
       - 컬럼: Silica 표면에 C18(Octadecyl)나 C8(Octyl) 같은 비극성 작용기 결합된 구조t
       - 이동상: 물:ACN 또는 물:methanol 같은 극성 용매 사용
       - 역상 컬럼 사용시에는 극성물질은 빨리 용출되고 비극성물질은 늦게 용출됨
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    장세호님의 답변

    이동상 용매는 순상, 역상에 따라 비극성, 극성으로 정해지는게 아니라 순상, 역상 뿐만 아니라 전개하고자 하는 물질의 극성 및 용해도에 맞게 단일용매 또는 다중용매를 조합해서 사용하면 됩니다.
    극성이냐 비극성이냐는 절대적인게 아니라 상대적인 개념이기 때문입니다.
    극성이 더 크냐 작냐로 생각해야 맞을 듯 싶습니다.
    예를 들어 hexane, MeOH 두 용매만 봤을 땐 MeOH이 더 극성용매이지만 그렇다고 해서 MeOH이 항상 극성이 큰 용매라고 하는 건 옳지 않습니다. 왜냐하면 MeOH 보다 더 극성인 용매가 많기 때문이지요(첨부 파일 참조).
    순상, 역상 개념은 윗분이 잘 설명해 주셨네요.
    순상이라고 해서 무조건 비극성 용매만 사용하지는 않습니다. 경우에 따라 일반 용매에 물, 염산, 암모니아, MeOH, DMSO와 같은 극성용매를 조합해서 사용하기도 합니다.
    특정 조건 또는 실험에서는 일반적으로 많이 사용하는 이동상 조합이 있습니다.
    예를 들면 HPLC 같은 경우는 일반적으로 역상의 column을 사용하며(순상 column을 사용할 때도 있음) 이동상 용매를 물, ACN, MeOH을 많이 사용하는데 이런 용매가 극성용매에 속하기 때문에 역상에는 극성용매를 사용한다고 생각할 수도 있습니다. 하지만 경우에 따라 물질의 안정성이나 분리능을 위해 buffer나 좀더 극성이 낮은 용매를 섞기도 합니다.
    이상 제 의견이었습니다.
    이동상 용매는 순상, 역상에 따라 비극성, 극성으로 정해지는게 아니라 순상, 역상 뿐만 아니라 전개하고자 하는 물질의 극성 및 용해도에 맞게 단일용매 또는 다중용매를 조합해서 사용하면 됩니다.
    극성이냐 비극성이냐는 절대적인게 아니라 상대적인 개념이기 때문입니다.
    극성이 더 크냐 작냐로 생각해야 맞을 듯 싶습니다.
    예를 들어 hexane, MeOH 두 용매만 봤을 땐 MeOH이 더 극성용매이지만 그렇다고 해서 MeOH이 항상 극성이 큰 용매라고 하는 건 옳지 않습니다. 왜냐하면 MeOH 보다 더 극성인 용매가 많기 때문이지요(첨부 파일 참조).
    순상, 역상 개념은 윗분이 잘 설명해 주셨네요.
    순상이라고 해서 무조건 비극성 용매만 사용하지는 않습니다. 경우에 따라 일반 용매에 물, 염산, 암모니아, MeOH, DMSO와 같은 극성용매를 조합해서 사용하기도 합니다.
    특정 조건 또는 실험에서는 일반적으로 많이 사용하는 이동상 조합이 있습니다.
    예를 들면 HPLC 같은 경우는 일반적으로 역상의 column을 사용하며(순상 column을 사용할 때도 있음) 이동상 용매를 물, ACN, MeOH을 많이 사용하는데 이런 용매가 극성용매에 속하기 때문에 역상에는 극성용매를 사용한다고 생각할 수도 있습니다. 하지만 경우에 따라 물질의 안정성이나 분리능을 위해 buffer나 좀더 극성이 낮은 용매를 섞기도 합니다.
    이상 제 의견이었습니다.
    등록된 댓글이 없습니다.
  • 답변

    최규석님의 답변

    네이버블로그에 있는 자료 첨부드립니다.

    처음 공부하시는 분들에게 도움이 될 것 같습니다.

    https://blog.naver.com/andy0010/130181063721

     블로그에 중고등학생한테 설명하는 듯 쉽게 되어있으니 한번 보세요.
    네이버블로그에 있는 자료 첨부드립니다.

    처음 공부하시는 분들에게 도움이 될 것 같습니다.

    https://blog.naver.com/andy0010/130181063721

     블로그에 중고등학생한테 설명하는 듯 쉽게 되어있으니 한번 보세요.
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