2020-09-28
org.kosen.entty.User@513be5af
장세호(caduceus)
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Maldi-MS를 사용해서 분자량을 측정하고 있습니다.
HPA(3-Hydroxypicolinic acid)를 사용해서 matrix를 만들어 분자량을 측정하면 +60~64Da의 side peak이 생깁니다.
Merck, TCI, 중국산 등 모두 99% 이상으로 여러가지 제품을 사용해도 +60~64Da의 peak이 생깁니다.
Side peak이 발생하지 않을 때까지 재결정을 반복해서 사용하고 있는데 무엇 때문에 이런 현상이 발생하는지 모르겠습니다.
재결정 한 번 만에 해결되기도 하는데 안될때는 3~4번까지 재결정해야 돼서 HPA를 사용하지 못하고 버리는게 더 많기도 합니다.
이런 경험이 있었던 분의 조언을 부탁드립니다.
① +60~64Da이 왜 생기며 정체가 뭘까요?
② HPA 문제가 아니라면 matrix 만들 때 side peak이 발생하지 않게 하는 방법이 있나요?
③ ACN/DW로 재결정 하고 있는데 다른 재결정 방법이 있나요?
④ 재결정 말고 다른 정제 방법은 없을까요?
HPA(3-Hydroxypicolinic acid)를 사용해서 matrix를 만들어 분자량을 측정하면 +60~64Da의 side peak이 생깁니다.
Merck, TCI, 중국산 등 모두 99% 이상으로 여러가지 제품을 사용해도 +60~64Da의 peak이 생깁니다.
Side peak이 발생하지 않을 때까지 재결정을 반복해서 사용하고 있는데 무엇 때문에 이런 현상이 발생하는지 모르겠습니다.
재결정 한 번 만에 해결되기도 하는데 안될때는 3~4번까지 재결정해야 돼서 HPA를 사용하지 못하고 버리는게 더 많기도 합니다.
이런 경험이 있었던 분의 조언을 부탁드립니다.
① +60~64Da이 왜 생기며 정체가 뭘까요?
② HPA 문제가 아니라면 matrix 만들 때 side peak이 발생하지 않게 하는 방법이 있나요?
③ ACN/DW로 재결정 하고 있는데 다른 재결정 방법이 있나요?
④ 재결정 말고 다른 정제 방법은 없을까요?
- Maldi-MS
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 2
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답변
이상후님의 답변
2020-10-06- 2
댓글에 대한 추가 답변으로,
아마 일반 소규모 랩에서는 용매에 포함되어 있는 metal ion 함량을 효과적으로 제거할 수 있는 정제법 셋팅이 어려울 것으로 생각됩니다. 상업화된 고순도 용매를 사용해야 합니다. 혹은 레이저 인텐서티를 변화를 주어서 side peak을 최소화 시키는 방법도 있습니다. -
답변
조윤환님의 답변
2020-09-29- 1
해당 매트릭스의 경우 순도도 순도지만 grade가 중요 합니다.
어떤 grade의 제품을 사용하셨는지가 중요 합니다.
예를 들어 같은 순도의 아세토니트릴 이라고 해도 HPLC grade, Spectroscophic grade, trace metal grade등이 다 다릅니다. 즉 용도에 맞는 grade를 사용해야 한다는 겁니다.
해당 매트릭스의 경우 금속이온의 함량을 확인하셔야 합니다. 금속이온의 함량이 결과에 영향을 미치기 때문입니다. 같은 Sigma-Aldrich 제품이어도 MALDI용 제품은 5~10배 정도 고가 입니다.
HPA 외에도 분석에 같이 사용하는 여타 화학물질, 예를 들어 용매류도 금속이온을 관리할 필요가 있습니다. 재결정을 해도 결과가 오락가락하는 이유가 아마도 이것이 아닐까 의심 됩니다.
해당 내용에 대해선 다음 문헌을 참고하시기 바랍니다.
Anal. Chem. 1996, 68, 3, 576–579
장세호(caduceus) 2020-09-29아... Merck에서 판매하는 MALDI용 HPA를 보니 금속이온 함량을 control 한거네요. 문제는 금속이온일 수 있겠네요. 감사합니다.
그런데 저희는 매달 많은 양의 HPA를 사용하는데 공기업이 아닌 사기업이기 때문에 저런 고가의 제품은 사용하기 어렵습니다.
결국, 금속이온을 제거해서 사용해야 하는데 적절한 방법이 있을까요?
감사합니다.