지식나눔

간세포 세포사멸 쪽 논문을 보던 중 질문드립니다.

논문 실험 data에서 IP와 Input를 비교하는 것이 나옵니다.
여기서 IP와 Input은 어떤 의미인지 궁금합니다. 
그리고 물질(성분) 앞에 sh있으면 nockout 되었다하던데 그 의미가 궁금합니다.
  • hepatocyte
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답변 3
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    한민준님의 답변

    IP (immunoprecipitation)은 특정 단백질에 binding 하는 단백질을 확인하는 기법입니다. 단백질 A를 antibody A로 pull-down해서 여기에 단백질 B가 binding 한다면 IP 후에 antibody B로 확인이 가능하겠죠. input은 일종의 control로 IP 과정중에 특정 단백질들이 샘플안에 존재한다는 의미입니다. 마찬가지로 IgG를 이용한 control도 필요합니다. 이 경우는 IgG antibody로 IP를 경우에는 우리가 원하는 단백질 B가 검출이 되지 않아야 하겠죠..
    shRNA를 의미하는 거 같은데요 shRNA (short hairpin RNA)는 특정 유전자를 silence 시킬수 있기때문에 Knock-down 실험에 주로 사용합니다. 엄밀하게 말하면 Knock-out은 아니구요. Knock-out을 시키려면 CRISPR-Cas9이나 TALEN과 같은 유전자 편집 기술을 이용해야 합니다.  
    IP (immunoprecipitation)은 특정 단백질에 binding 하는 단백질을 확인하는 기법입니다. 단백질 A를 antibody A로 pull-down해서 여기에 단백질 B가 binding 한다면 IP 후에 antibody B로 확인이 가능하겠죠. input은 일종의 control로 IP 과정중에 특정 단백질들이 샘플안에 존재한다는 의미입니다. 마찬가지로 IgG를 이용한 control도 필요합니다. 이 경우는 IgG antibody로 IP를 경우에는 우리가 원하는 단백질 B가 검출이 되지 않아야 하겠죠..
    shRNA를 의미하는 거 같은데요 shRNA (short hairpin RNA)는 특정 유전자를 silence 시킬수 있기때문에 Knock-down 실험에 주로 사용합니다. 엄밀하게 말하면 Knock-out은 아니구요. Knock-out을 시키려면 CRISPR-Cas9이나 TALEN과 같은 유전자 편집 기술을 이용해야 합니다.  
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    장성재님의 답변

    위에 답변을 주신 분께서 대략적으로 설명을 잘해주셨습니다만, 님께서 보신 논문을 알려주셔야 정확한 의미를 설명드릴 수 있을 것 같습니다..
    위에 답변을 주신 분께서 대략적으로 설명을 잘해주셨습니다만, 님께서 보신 논문을 알려주셔야 정확한 의미를 설명드릴 수 있을 것 같습니다..
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    김헌성님의 답변

    IP (immunoprecipitation)은 특정 단백질에 binding 하는 단백질을 확인하는 실험입니다.
    bead를 사용하여 실험을 합니다.
    input은 I.P의 control 군을 말합니다.
    sh는 shRNA를 말하는 것이고요  비슷한게 Si-RNA (small(또는 short) interfering RNA) 특정유전자를 Knock down 시키고요  shRNA는 (short hairpin RNA) 특정유전자를 Knock out 시키는 역할을 합니다.  
    IP (immunoprecipitation)은 특정 단백질에 binding 하는 단백질을 확인하는 실험입니다.
    bead를 사용하여 실험을 합니다.
    input은 I.P의 control 군을 말합니다.
    sh는 shRNA를 말하는 것이고요  비슷한게 Si-RNA (small(또는 short) interfering RNA) 특정유전자를 Knock down 시키고요  shRNA는 (short hairpin RNA) 특정유전자를 Knock out 시키는 역할을 합니다.  
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