2021-02-18
org.kosen.entty.User@541b30c8
조재형(jh5086)
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안녕하세요.
대장균에서 발현시킨 단백질용 의약품 생산에 있어 산업 현장에서는 어떤 방법으로 endotoxin을 제거하는지 궁금하여 문의 드립니다.
lab scale에서는 현재 triton x-114를 이용한 방법과 anion exchange chromatography를 이용한 방법, 그리고 pall이나 thermo 같은 곳에서 파는 전용 filter를 사용해서 공정을 잡고 있는데..
현장에서는 어떤 방법으로 진행하는지 궁금합니다.
모두 건강하세요.
대장균에서 발현시킨 단백질용 의약품 생산에 있어 산업 현장에서는 어떤 방법으로 endotoxin을 제거하는지 궁금하여 문의 드립니다.
lab scale에서는 현재 triton x-114를 이용한 방법과 anion exchange chromatography를 이용한 방법, 그리고 pall이나 thermo 같은 곳에서 파는 전용 filter를 사용해서 공정을 잡고 있는데..
현장에서는 어떤 방법으로 진행하는지 궁금합니다.
모두 건강하세요.
- endotoxin
- industrial
- 엔도톡신
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 4
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답변
강석찬님의 답변
2021-02-22- 2
우선, 상업화시설에서 사용하는 버퍼제조용 3차수에 대한 엔도톡신 관리가 중요하구요
정제공정 진행 전에는 라인 및 레진에 대해 NaOH 로 soaking 하는 과정이 있어야 됩니다. -
답변
변경필님의 답변
2021-02-25- 2
생산 공정, IPC 시험 방법 및 제거대상 공정중 중간체의 량등에 따라 filter 또는 chromatography을 선택 됩니다.
공정 개발 단계에서 해당 제거과정의 수율 계산 및 최종 산물에서의 농도를 고려하여 밸리데이션을 하여 그 결과를 바탕으로 적합한 방법(품질에 영향을 최소화 하고, 생산 단가등을 고려)을 선택합니다.
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답변
조윤환님의 답변
2021-02-25- 2
양산 공정에 초점을 맞춰 설명을 드리겠습니다.
우선 엔도톡신 제거는 질문에서 언급하신 Lab에서 사용하는 방법이 모두 동원된다고 생각하시면 되겠습니다. 공정의 유효성, 편의성, 경제성 등이 고려되어야겠죠.
대표적으로 물-유기용제 추출법, 울트라필터법, 크로마토그래피(이온크로 포함), 전기영동법, 계면활성제 세척법 등이 사용되고 드물지만 단백질 효소 분해법이나 원심분리법 등도 사용되곤 합니다.
의약품 생산공정에서 발생된 엔도톡신을 제품에서 제거하는 과정은 반듯이 필요하지만 이 처리 공정으로 인해서 제품에 영향이 발생하거나 이 공정에 사용된 물질을 다시 제거하기 위해 추가적인 공정이 필요한 경우도 있기 때문에 다양한 가능성을 열어두고 검토해야 합니다.
모든 상업생산 공정을 개발할 때의 화두는 역시 생산성, 경제성, 안전, 규제가 되겠습니다. 득실을 잘 따져서 최적의 공정을 설계하는 균형 잡힌 판단이 중요 합니다.
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답변
장세호님의 답변
2021-02-26- 2
실험실에서 세팅된 방법을 양산공정(대량생산)에 맞춰 scale-up 하는데 보통 비슷한 방법으로 진행됩니다. 물론 scale 이 달라지므로 사용 기자재는 달라지겠지만...
Endotoxin의 물성을 정확히 모르는 상태라 일반적인 방법을 말씀드리자면 용해도를 이용한 유-수 분리법, 결정화(recrystallization, precipitation 등), 여과법(filter, membrane filter 등), 정제법, 활성탄 사용 등 여러가지가 있습니다. 윗 분들하고 많이 겹치네요.
저희도 양산하면서 purity와 yield 사이에서 많이 고민하고 있습니다만 모쪼록 좋은 결과를 얻을 수 있는 조건을 찾으시길 바랍니다.
답변 감사드립니다.