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지식나눔

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western blot 실험에서 ImageQuant LAS 500로 detection할때 궁금한 점이 있어 질문드립니다.

2021-09-14 org.kosen.entty.User@55eff1d5 조수호(kist22)
  • 2
 Western blot 실험에서 mesangial cell을 가지고 high glucose를 time-dependent하게 처리하여 ImageQuant LAS 500로 detection할떄 0시간에서만 target band가 하얗게 됩니다. beta-actin 같은 경우는 0시간때에서도 detection이 잘 됩니다. 정량의 문제는 아닌 것 같습니다. 0시간에서만 target band가 하얗게되는 원인과 해결방안이 궁금합니다. 감사합니다.
  • western blot
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답변 2
  • 답변

    한민준님의 답변

    2021-09-16
    • 2
    보통 film을 이용할때 ECL을 너무 많이 사용할 경우 반응이 너무 강하면 하얗게 타는데요..
    같은 문제인지 모르겠습니다. 
    혹시 다른 밴드의 시그날도 강하다면 ECL 반 DW 반 이렇게 희석해서 한번 다시 찍어 보세요. 
     
    답변수정
    보통 film을 이용할때 ECL을 너무 많이 사용할 경우 반응이 너무 강하면 하얗게 타는데요..
    같은 문제인지 모르겠습니다. 
    혹시 다른 밴드의 시그날도 강하다면 ECL 반 DW 반 이렇게 희석해서 한번 다시 찍어 보세요. 
     
    등록된 댓글이 없습니다.
  • 답변

    조준석님의 답변

    2021-10-05
    • 0
    밴드가 하얗다는것은 밴드 detection이 안 된다는 뜻인가요?
    target하시는 단백질이 glucose 처리하지 않았을때 발현이 안 되는것은 아닌가요? 
    답변수정
    밴드가 하얗다는것은 밴드 detection이 안 된다는 뜻인가요?
    target하시는 단백질이 glucose 처리하지 않았을때 발현이 안 되는것은 아닌가요? 
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