지식나눔

IHC isotype control staining 이유

Mouse tisse에서 IHC를 진행하고 있습니다.

한 slide에 paraffin section이 2개 있고 하나는 target protein antibody, 하나는 Isotype control IgG를 incubation했습니다.

동일한 slide위에 있으니 defaraffinization, washing, blocking, 1차 및 2차 항체 incubation, DAB 발색 등등

모두 동일하게 진행되었습니다.

Target protein antibody는 rabbit antibody고  Isotype control IgG도 rabbit IgG입니다.

2차 항체는 당연히 anti-rabbit-HRP를 사용하구요.

그런데 Target protein antibody를 incubation한 tissue에선 staining이 하나도 되지 않고 깔끔한데

Isotype control IgG를 incuabtion한 tissue에선 갈색으로 staining되었습니다.


1차 항체를 바꿔서 사용하지도 않았는데 도저히 이해가 되질 않아 조언을 구하고자 질문 올렸습니다.

  • IHC
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