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안녕하세요
유기합성을 하는 대학원생입니다
지금껏 정상 실리카만을 사용하여 오픈컬럼으로 물질을 분리했었는데요,
새로운 프로젝트에서 만들 물질의 극성이 상당히 큰 걸로 예상됩니다. 그래서 10%MeOH/MC로 분리가 안됩니다.
그래서 역상 실리카겔을 이용하여 컬럼 크로마토그래피를 진행하고 싶습니다.
검색해보니 역상 실리카의 가격이 생각보다 비싼데, 재활용하여 계속 쓸 수 있는 건가요?
정상 컬럼 크로마토그래피를 하는 것과 동일하게 진행하면 되는지, 선생님들은 무슨 실리카 제품을 사용하시는지 궁금합니다.
답변 주시면 감사하겠습니다...
- 크로마토그래피
- 컬럼
- 분리
- 역상
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변
조윤환님의 답변
2024-11-08- 0
역상컬럼으로 오픈컬럼을 해본 경험이 있는 분들이 많지 않을 겁니다. 말씀하신 것처럼 가격이 비싸기 때문이죠.
저는 시판용 MPLC컬럼으로 prep-chlromatography 분리를 해본 경험도 있고, 일반 실리카겔을 실란계열로 표면을 유도체화해서 RP컬럼으로 활용해본 경험도 있습니다.
컬럼이 있다고 해서 분리가 잘 되는 것은 아닙니다. 우선은 분리 조건을 잘 세팅할 수 있어야 하는데, 시판용 C18 prep. column이나 MPLC컬럼으로 분리하기 전에 HPLC로 분리조건을 잘 잡는 것이 필요합니다. 그러려면 HPLC 분석조건에 대한 경험이 많이 필요하죠.
제 생각엔 실리카겔 오픈컬럼이 익숙하기 때문에 훨씬 적응하기 쉬울 것 같다는 생각이 듭니다. 물질의 극성이 높더라도 실리카겔 컬럼으로 분리 가능한 경우도 많습니다. 실리카겔 컬럼을 약간 deactivation시켜서 사용하거나, 알루미나(산성, 중성 등 있음)사용하는 방법도 있습니다. 검토해보시길.
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답변
양현모님의 답변
2024-11-14- 0
컬럼 관에 정상 실리카를 채워서 분리하시는 것으로 보입니다. 위쪽에 압력을 주지 않으시는 상태로 보이고요.
1. 역상 실리카겔은 구매가 가능합니다. 정상 실리카 컬럼을 진행하셨다면 생각보다 용매 떨어짐이 매우 느려요~
똑똑똑~떨어진다는 느낌으로 보시면 됩니다. 역상 TLC 도 팔고요.
용매는 당연히 물 (buffer) 하고 ACN 을 사용을 보통 하고요.
2. 통상 재활용 해서 사용합니다. 보통 정상도 재활용해도 되는데, 용매로 씻는 것보다 그냥 새거 쓰는게 편해서 그렇게 하지요.
보통 극성이 높은 형태는 Prep-HPLC 형태로 분리를 많이 합니다. 이쪽을 더 추천드려요.
역상 실리카 컬럼을 하고자 하신다면 인근 천연물 분리하시는 분들쪽에서 얻으실 수 있지 않을까 합니다.
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답변
이홍섭님의 답변
2024-11-14- 0
윗분들이 대부분 내용을 잘 쓰셨으니 몇가지 보충만 합니다1. 역상실리카는 비쌉니다. 역상 TLC나 HPLC로 조건 잡으시고 loading 할때는 가드 컬럼 쓰셔야 다음에도 같은 조건으로 사용이 가능하고 쓰는 컬럼도 재사용이 가능합니다 안그럼 막혀요2. 가압을 하던 밑에서 당기던 일정한 속도가 중요합니다. .3. 실리카나 RP도 안되면 LH20을 normal phase silica 쓰듯이 소량만 좀 길게 써보시면 놀라운 경험을 하실수 있습니다. 다만 매우 비싸기 때문에 조심하시고 재생도 됩니다