지식나눔

Cell organism에 따른 over-expression protein 변화

HEK293T cell 제가 보고자 하는 mouse gene이 cloning된 vector를 transfection해서 over expression 실험을 하고 있습니다.

HEK293T의 organism은 human인데 혹시 mouse gene을 over-expression했을 때 생성된 mouse protein이

PTM이라던가 그런 것 때문에 endogenous protein과 구조나 서열 같은게 다를 수 있을 까요? 

  • Over expression
  • protein
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답변 1
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    한민준님의 답변

    PTM으로 구조나 서열이 바뀌지는 않습니다. 

    또한 많은 mAb이나 단백질들이 CHO cell에서 발현해서 정제하는 것을 보면 

    이런것으로 큰 문제가 생기지는 않을거 같습니다. 

    다만 proetin의 경우 DNA work과는 다르게 사실 예측이 많이 어렵습니다. 구조가 같다고 같은 function을 기대하기도 어려울 수 있구요. 

    이런 경우는 안전하게 TAG (GFP, FLAG)을 달아서 확인해주면 편할거 같습니다. 

    PTM으로 구조나 서열이 바뀌지는 않습니다. 

    또한 많은 mAb이나 단백질들이 CHO cell에서 발현해서 정제하는 것을 보면 

    이런것으로 큰 문제가 생기지는 않을거 같습니다. 

    다만 proetin의 경우 DNA work과는 다르게 사실 예측이 많이 어렵습니다. 구조가 같다고 같은 function을 기대하기도 어려울 수 있구요. 

    이런 경우는 안전하게 TAG (GFP, FLAG)을 달아서 확인해주면 편할거 같습니다. 

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