2004-10-05
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허경선(ksheo)
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안녕하세요.
Cl channel에 관한 공부를 하고 싶은데요,
channel detection 방법중 molecular probe (lucigenin, MQAE, SPQ등)를
이용한 fluoroscene를 이용하는데 있어서 의문점이 있어서 글을 올립니다.
먼저, molecular probe 처리 후, cell을 깰 경우,
lysis buffer 조성은 어떻게 되나요?
혹은, cell을 그냥 뜯어내서 관찰할 경우 buffer는 어떤걸 써야 하나요?
아시는 분 있으면 조언 부탁드립니다.
그리고, 위의 내용 말고도 cl channel detection에 관한 귀중한 정보를 구합니다.
그럼, 행복한 하루 되세요^^
- Cl channel
- molecular probe
- fluoroscence
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답변 5
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답변
김성원님의 답변
2004-10-06- 0
Molecular Probes에서 나온 Manual은 읽어 보셨겠지요. 그걸 보니 cell lysis는 좋은 방법이 아닌 것 같습니다. 아마 Cl-를 정량하려 하시는 것 같은데 다른 방법을 찾아보시는 것이 어떨까요? 예를 들면 고전적이긴 하지만 patch clamp같은 것 말이지요. 다른 것들과 달리 이 dye들은 Cl- 농도를 dye들의 quenching 정도로 구분을 하는 것 같은데 lysis시 발생하는 각종 ion과 reactive species, 단백질..모든 것들이 quenching을 유발시킬 수 있을 것 같습니다. 게다가 highly sensitive quenching이라 하니 아마 형광이 noise level로 나오지 않을까요.. 그리고 정성적으로 현미경 관찰하실 때, 형광현미경이라면 그냥 well이나 dish에 키워서 뜯지말고 보시는 것이 좋겠습니다. confocal을 보시려면 cover glass 위에 cell culture하셔서 dye처리 후 바로 고정해서 보시면 좋겠군요. 괜히 방해만 하는게 아닌지..죄송합니다. 한국과학기술원 김성원 드림 -
답변
허경선님의 답변
2004-10-06- 0
많은 정보 얻었습니다. 감사드립니다. -
답변
백기태님의 답변
2004-10-06- 0
관련 논문이 2편 더 있네요.. -
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백기태님의 답변
2004-10-06- 0
도움이 될지 모르겠지만.. CLC에 관한 내용입니다. 도움이 되기를 바라겠습니다. -
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전주홍님의 답변
2004-10-06- 0
도움이 될지는 모르겠지만 첨부파일을 올립니다.