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지식나눔

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근육 sample을 homogenization하는 방법에 대해 알고 싶습니다.

2005-01-14 org.kosen.entty.User@7257fe64 신연남(yannan1016)
  • 2
근육 sample을 homogenization하는 방법에 대해 알고 싶습니다.
  • homogenization
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답변 2
  • 답변

    신정규님의 답변

    2005-01-14
    • 0

    첨부파일

    >근육 sample을 homogenization하는 방법에 대해 알고 싶습니다. Media for muscle homogenization are also quite variable and although compositions not unlike those for soft tissues have been used, KCl is often included (up to 180 mM) to solubilize some of the protein and prevent the formation of gels. The following media have been successfully used: 0.21 M mannitol, 70 mM sucrose, 0.1 mM EDTA, 0.5% bovine serum albumin (BSA), 10 mM Tris-HCl, pH 7.4 or 0.1 M sucrose, 10 mM EDTA, 46 mM KCl, 0.5% BSA, 100 mM Tris-HCl, pH 7.4 [3]. After coarse mincing of muscle tissue, it is commonly softened by incubating with Nagarse at 5-50 mg per 100ml at 4°C for about 5 min.
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    >근육 sample을 homogenization하는 방법에 대해 알고 싶습니다. Media for muscle homogenization are also quite variable and although compositions not unlike those for soft tissues have been used, KCl is often included (up to 180 mM) to solubilize some of the protein and prevent the formation of gels. The following media have been successfully used: 0.21 M mannitol, 70 mM sucrose, 0.1 mM EDTA, 0.5% bovine serum albumin (BSA), 10 mM Tris-HCl, pH 7.4 or 0.1 M sucrose, 10 mM EDTA, 46 mM KCl, 0.5% BSA, 100 mM Tris-HCl, pH 7.4 [3]. After coarse mincing of muscle tissue, it is commonly softened by incubating with Nagarse at 5-50 mg per 100ml at 4°C for about 5 min.
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  • 답변

    박인영님의 답변

    2005-01-25
    • 0
    >근육 sample을 homogenization하는 방법에 대해 알고 싶습니다. Mouse인 경우 넓적다리 부분을 면도칼로 발라내듯이 긁어내어 일반적인 homogenizer로 하시면 됩니다. 실험 목적에 따라 다르겠지만 DNA나 RNA를 뽑는 경우 별 문제가 없었습니다. genomic DNA의 경우 면도칼이나 작고 예리한 가위로 최대한 잘라주시고, extraction buffer (10 mM Tris-Cl pH8.0, 0.1 M EDTA pH 8.0, 0.5 % SDS, 20 ug/ml RNase)에서 proteinase K(100ug/ml)로 50도에서 overnight digestion하시면 homogenization을 대신 할 수 있습니다. Total RNA인 경우 Invitrogen의 trizol solution에서 homogenization하시면 되고요. Protein인 경우 ice cold PBS나 일반적으로 사용하는 IP buffer 등을 사용했지만 별 문제 없더군요. 참고하시길..
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    >근육 sample을 homogenization하는 방법에 대해 알고 싶습니다. Mouse인 경우 넓적다리 부분을 면도칼로 발라내듯이 긁어내어 일반적인 homogenizer로 하시면 됩니다. 실험 목적에 따라 다르겠지만 DNA나 RNA를 뽑는 경우 별 문제가 없었습니다. genomic DNA의 경우 면도칼이나 작고 예리한 가위로 최대한 잘라주시고, extraction buffer (10 mM Tris-Cl pH8.0, 0.1 M EDTA pH 8.0, 0.5 % SDS, 20 ug/ml RNase)에서 proteinase K(100ug/ml)로 50도에서 overnight digestion하시면 homogenization을 대신 할 수 있습니다. Total RNA인 경우 Invitrogen의 trizol solution에서 homogenization하시면 되고요. Protein인 경우 ice cold PBS나 일반적으로 사용하는 IP buffer 등을 사용했지만 별 문제 없더군요. 참고하시길..
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