2005-01-18
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김춘기(kimchunki)
- 4
안녕하세요.
제가 vascular smooth muscle cell을 cord (탯줄)에서 분리하려고 합니다.
분리를 시도를 해보았는데 세포가 안나오는군요. 분리방법을 아시는 분은 도움을 부탁드립니다. 또한 culture조건도 다양한 것 같은데 어떤 방법이 경제적인지 가르쳐 주십시요. Primary cell culture하시는 분이 계시면 어떤 방법이든 저에게 도움을 주시면 감사하겠습니다. 그리고 혹시 mouse의 혈관에서도 분리하는 방법을 아시고 계신분도 도움을 주세요.
그럼 연구에 좋은 결과들이 있으시길 바라며 ...
김춘기 올림
- VSMC
- isolation
- Primary cell culture
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 4
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답변
김춘기님의 답변
2005-01-18- 0
답변 감사합니다. 먼저 저의 보스가 김영명선생님입니다. 그리고 공영윤 선생님 방에서 rat에서 분리하는 프로토콜을 받아서 human에서 분리해 보았습니다만 잘 분리가 안되는 군요..저희는 지금 cambrex co. 에서 FBS와 growth factor set을 구입해서 culture하고 있습니다만 너무 고가여서 저렴하게 culture하는 방법을 구하려 합니다. 분리를 많이 하시는 분이 계시면 꼭 리플 달아주시면 감사하겠습니다. 김춘기 올림 >VSMC 일차배양...이넘 정말 돈 많이 들어가고 힘든 세포주입니다. >유지비가 장난이 아니거든요...비싼 것만 먹고 삽니다. >첨 꺼내서 뿔리면 일단 3-4 세대는 지나고요, >실험좀 할려고 하면 12세대를 넘어서 버려야 하고요 (실제는 한 20세대정도까지는 사용합니다만..) > >분리방법은 움..강원의대의 김영명 선생님에게 물어보시면 될 듯 합니다. Rat라면 포항공대의 공영윤교수님 팀에서 잘하고 있는 것으로 압니다. > >인간 VSMC 일차배양은 힘든것은 아니지만 돈이 너무 많이 들어갑니다. >그래서 싼것으로도 배양이 가능한 (첨가물을 안넘) rat를 쓰지요. > >답변이 너무 두리뭉실해서........도움이 될런지요? ㅉㅉ > -
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김동욱님의 답변
2005-01-18- 0
VSMC 일차배양...이넘 정말 돈 많이 들어가고 힘든 세포주입니다. 유지비가 장난이 아니거든요...비싼 것만 먹고 삽니다. 첨 꺼내서 뿔리면 일단 3-4 세대는 지나고요, 실험좀 할려고 하면 12세대를 넘어서 버려야 하고요 (실제는 한 20세대정도까지는 사용합니다만..) 분리방법은 움..강원의대의 김영명 선생님에게 물어보시면 될 듯 합니다. Rat라면 포항공대의 공영윤교수님 팀에서 잘하고 있는 것으로 압니다. 인간 VSMC 일차배양은 힘든것은 아니지만 돈이 너무 많이 들어갑니다. 그래서 싼것으로도 배양이 가능한 (첨가물을 안넘) rat를 쓰지요. 답변이 너무 두리뭉실해서........도움이 될런지요? ㅉㅉ >안녕하세요. >제가 vascular smooth muscle cell을 cord (탯줄)에서 분리하려고 합니다. >분리를 시도를 해보았는데 세포가 안나오는군요. 분리방법을 아시는 분은 도움을 부탁드립니다. 또한 culture조건도 다양한 것 같은데 어떤 방법이 경제적인지 가르쳐 주십시요. Primary cell culture하시는 분이 계시면 어떤 방법이든 저에게 도움을 주시면 감사하겠습니다. 그리고 혹시 mouse의 혈관에서도 분리하는 방법을 아시고 계신분도 도움을 주세요. >그럼 연구에 좋은 결과들이 있으시길 바라며 ... >김춘기 올림 -
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옥민호님의 답변
2005-01-21- 0
저 역시 허접 답변 일수 있겠습니다만.. ^^ 저희도 VSMCs를 구입하여 사용하였습니다. kit set 를 사서 culture하면, 돈이 확실이 많이 들기는 하죠. 어떤 kit를 사용하시는지는 모르겠지만, 저 같은 경우는... MCDB131 (Gibco), Serum (FBS 10%, 실수로 FCS를 넣어 보기도 했는데, 잘 되더군요.. ^^;;;), L-glutamate, 및 anti-biotics 그리구, growth factor 로는 insulin, bFGF, EGF 를 넣어서 culture했습니다. growth factor 가격이 비싼 관계로, 여러군데 알아보고 구입해서 사용했습니다만 (독일에서 나오는 거 썼었습니다. 기억이 가물가물.. 필요하시다면, 찾아서 연락드리지요), 이렇게 사용하니깐, culture는 물론 잘 되구요, 이런 방법이 VSMCs 의 대가들이 있는 실험실에서도 사용하더군요. 그리구, rat에서 분리해서 사용하기도 했는데, 실험 내용에 따라서 VSMCs와 다른 데이터를 주지는 않았습니다. rat에서 분리 한거 같은 경우는 MEM+FBS 에서 아주 잘 자랍니다. 허접 답변입니다만, 혹시 미듐이나 growth factor 조합에 도움이 되었기를 바랍니다. ^^ >답변 감사합니다. >먼저 저의 보스가 김영명선생님입니다. 그리고 공영윤 선생님 방에서 rat에서 분리하는 프로토콜을 받아서 human에서 분리해 보았습니다만 잘 분리가 안되는 군요..저희는 지금 cambrex co. 에서 FBS와 growth factor set을 구입해서 culture하고 있습니다만 너무 고가여서 저렴하게 culture하는 방법을 구하려 합니다. 분리를 많이 하시는 분이 계시면 꼭 리플 달아주시면 감사하겠습니다. >김춘기 올림 > >>VSMC 일차배양...이넘 정말 돈 많이 들어가고 힘든 세포주입니다. >>유지비가 장난이 아니거든요...비싼 것만 먹고 삽니다. >>첨 꺼내서 뿔리면 일단 3-4 세대는 지나고요, >>실험좀 할 고 하면 12세대를 넘어서 버려야 하고요 (실제는 한 20세대정도까지는 사용합니다만..) >> >>분리방법은 움..강원의대의 김영명 선생님에게 물어보시면 될 듯 합니다. Rat라면 포항공대의 공영윤교수님 팀에서 잘하고 있는 것으로 압니다. >> >>인간 VSMC 일차배양은 힘든것은 아니지만 돈이 너무 많이 들어갑니다. >>그래서 싼것으로도 배양이 가능한 (첨가물을 안넘) rat를 쓰지요. >> >>답변이 너무 두리뭉실해서........도움이 될런지요? ㅉㅉ >> > -
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김동욱님의 답변
2005-01-25- 0
별 신통한 답이 못되었네요. ㅉㅉ 아마도 EC와 VSMC의 mixed culture가 문제가 될듯 합니다. 사실 저희 랩도 이런 문제때문에, Clonetics에서 균주를 사쓰고 있습니다. 저희도 이 문제에 대해서 관심이 많습니다. 또 해결이 되면 답을 드리겠습니다. 좋은 해답을 구하시면 연락 좀 부탁드립니다. >답변 감사합니다. >먼저 저의 보스가 김영명선생님입니다. 그리고 공영윤 선생님 방에서 rat에서 분리하는 프로토콜을 받아서 human에서 분리해 보았습니다만 잘 분리가 안되는 군요..저희는 지금 cambrex co. 에서 FBS와 growth factor set을 구입해서 culture하고 있습니다만 너무 고가여서 저렴하게 culture하는 방법을 구하려 합니다. 분리를 많이 하시는 분이 계시면 꼭 리플 달아주시면 감사하겠습니다. >김춘기 올림 > >>VSMC 일차배양...이넘 정말 돈 많이 들어가고 힘든 세포주입니다. >>유지비가 장난이 아니거든요...비싼 것만 먹고 삽니다. >>첨 꺼내서 뿔리면 일단 3-4 세대는 지나고요, >>실험좀 할려고 하면 12세대를 넘어서 버려야 하고요 (실제는 한 20세대정도까지는 사용합니다만..) >> >>분리방법은 움..강원의대의 김영명 선생님에게 물어보시면 될 듯 합니다. Rat라면 포항공대의 공영윤교수님 팀에서 잘하고 있는 것으로 압니다. >> >>인간 VSMC 일차배양은 힘든것은 아니지만 돈이 너무 많이 들어갑니다. >>그래서 싼것으로도 배양이 가능한 (첨가물을 안넘) rat를 쓰지요. >> >>답변이 너무 두리뭉실해서........도움이 될런지요? ㅉㅉ >> >