2005-07-21
org.kosen.entty.User@24c82d48
구광본(kkb418)
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당에 관한 실험을 진행중입니다.
rat에서 장기추출을해서 Total RNA을 뽑아서 우선 Northern blot등 여러 실험을 할예정입니다...
우선 IL-2 , Bcl2 유전자로 Northern Blot하는이유..를 알고 싶습니다.
그리고 현재진행중인 실험에서 분자생물학적으로 접근할수있는 실험방향을 알고 싶습니다(RT-PCR, cDNA library 등).
- diabetes
- Il-2
- northern
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답변 1
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답변
홍진성님의 답변
2005-07-21- 0
>당에 관한 실험을 진행중입니다. >rat에서 장기추출을해서 Total RNA을 뽑아서 우선 Northern blot등 여러 실험을 할예정입니다... >우선 IL-2 , Bcl2 유전자로 Northern Blot하는이유..를 알고 싶습니다. >그리고 현재진행중인 실험에서 분자생물학적으로 접근할수있는 실험방향을 알고 싶습니다(RT-PCR, cDNA library 등). 보통 우리가 생물체에서 RNA를 추출해서 특정한 유전자의 발현정도를 확인할경우, 특정유전자의 RNA및 단백질 발현을 비교하여 그 정도를 추정하게됩니다. 귀 질문자의 경우 무엇을 어떻게 어떤목적으로 실험을 하는지에대한 방향이 제시되지않아서 답변이 너무 광범위하게되었군요. 우선, total RNA를 추출하여 Northern blot(RNA blot)을 하는경우는 위에서 언급한바와같이 특정유전자가 발현하는지와 그 발현량을 정량화하는 방법으로 사용되고있습니다. 최근에는 실시간PCR(Real time PCR)을 사용하여 RNA의 량을 정량하고있습니다. 언급하신 IL-2, Bcl2 유전자의 경우, Northern blot을 하는이유를 질의하였는데, control로 사용하고자 하는것은 아닐런지요.. 어떤 유전자의 발현량을 조사할경우 컨트롤이 필요하게되는데 이는 항상 발현하고있는 하우스키핑유전자등(발현량이 일정한 유전자를 대조구로 사용하는것이 알반적이거든요..)으로 실험의 오차가 없음을 나타내는 척도로 사용합니다. 그러나 귀하의 경우, 실험진행상 어떤생물학적 또는 화학적처리등을 통하여 언급하신 유전자의 발현량에 변화가있는지에 대한 조사를 하시고싶어 Northern blot(참고로 IL-2나, Bcl2의 경우 면역에 관련된 유전자이므로) 을 하시는것으로 이해됩니다. 현재진행중인 실험이 무엇인지 잘모르겠습니다만, RT-PCR의경우, RNA의 발현을 확인하거나 증폭하여 실험의 목적에 부합한재료를 준비하는데 사용하는 가장 기본적인 실험툴입니다. 이에대한 실험방법에대해서는 웹상에서도 잘 제공되고있기때문에 시약을 취급하는 회사(예로, Promega나 Takara 등 )의 사이트에가시면 자세한 방법을 알수있구요.. 답변이 되었나 모르겠습니다. 좋은 연구하시길 바랍니다.