2005-10-04
org.kosen.entty.User@1f459540
김선영(gari01)
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세포분리를 MACS에 의해서 하려하는데요~
cytosol에 분비되는 세포의 primary antibody라서 secondary antibody
가 안으로 들어가야 할듯한데....
혹시 이러한 안에서 분비하는 세포의 상피세포를 분리하는 방법 아시는
분 꼭 좀 알려 주세요~ FACS 방법은 넘 생존율이 낮아서요..
부탁드립니다
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 2
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답변
이정원님의 답변
2005-10-11- 0
일단 먼저 질문을 정확히 이해할 수가 없네요. 제가 이해한 경우로 다시 설명하자면, 만들어져 cytosol에 위치하는 단백질을 가지는 세포만을 그렇지 않은 세포들로부터 분리하고 싶다는 뜻으로 이해하면... 먼저, endogenous 발현하는 protein의 존재에 의해 분리는 살은 상태로 분리가 힘듭니다. 그 단백질과 같은 발현 양상을 보이는 다른 marker를 물색하셔야 할 듯 하고요 둘째, 만약 exgenous하게 plasmid를 집어넣어 발현을 시키자면, 너무나도 쉽게 (G418 혹은 hygromycin resistance geen을 가진 요즈음의 대부분 plasmid의 경우에) transfection후 2일 정도 지난 후에 G418 혹은 hygromycin으로 selection을 하거나, CD2와 같은 inert(?)한 marker membrane protein을 위해 cotransfection후 CD2에 대해 immunomagnetic bead selection을 하면 됩니다. >세포분리를 MACS에 의해서 하려하는데요~ > >cytosol에 분비되는 세포의 primary antibody라서 secondary antibody > >가 안으로 들어가야 할듯한데.... > >혹시 이러한 안에서 분비하는 세포의 상피세포를 분리하는 방법 아시는 > >분 꼭 좀 알려 주세요~ FACS 방법은 넘 생존율이 낮아서요.. > >부탁드립니다 -
답변
이숙경님의 답변
2005-10-11- 0
>세포분리를 MACS에 의해서 하려하는데요~ > >cytosol에 분비되는 세포의 primary antibody라서 secondary antibody > >가 안으로 들어가야 할듯한데.... > >혹시 이러한 안에서 분비하는 세포의 상피세포를 분리하는 방법 아시는 > >분 꼭 좀 알려 주세요~ FACS 방법은 넘 생존율이 낮아서요.. > >부탁드립니다 질문이 무엇을 알고자 하는 것인지 이해하기가 어렵습니다. 다시 한번 무엇을 알고 싶은 것인지 정리해 알려주세요.