2005-12-01
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권호근(ggondae98)
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안녕하세요
저는 이제 석사 1년을 하고 있는 학생입니다.
다름이 아니라 제가 지금 실험실에서 lentivirus를 이용해서 transfection을 시도하고 있는데요
운좋게도 expression vector까지는 만들었는데 그것을 expression시켜 transfection시키는 과정에서 꽉 막혀있어 이렇게 글을 남기게 되었습니다.
한번 시도 했는데 결과는 실패로 나왔구요...
titer를 확인해야 한다고 하는데 어떻게 해야 하는지도 잘 모르겠고
또 transfection을 할때 viral soup을 농축 시키도 polybene(?)을 써서 infection시켜야 한다고 하는데 정말 아무것도 모르겠습니다ㅠㅠ
위에서는 계속 왜안되냐고 쪼기만 하시고 정말 답답해 죽겠습니다...
혹시 lenti가지고 실험하셨던 분이 있으시다면 그냥 지나치지 마시고 꼭 좀 도와주세요...
- Lentivirus
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 2
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답변
김성환님의 답변
2005-12-09- 0
에서 lentivirus 실험을 잘 하고 있답니다. 예전에 lentivirus관련된 문의를 드렸는데 친절하게 알려주시더군요. 그곳 연구원들에게 전화 한번 해보세요. -
답변
정철웅님의 답변
2006-02-10- 0
>안녕하세요 >저는 이제 석사 1년을 하고 있는 학생입니다. >다름이 아니라 제가 지금 실험실에서 lentivirus를 이용해서 transfection을 시도하고 있는데요 >운좋게도 expression vector까지는 만들었는데 그것을 expression시켜 transfection시키는 과정에서 꽉 막혀있어 이렇게 글을 남기게 되었습니다. >한번 시도 했는데 결과는 실패로 나왔구요... >titer를 확인해야 한다고 하는데 어떻게 해야 하는지도 잘 모르겠고 >또 transfection을 할때 viral soup을 농축 시키도 polybene(?)을 써서 infection시켜야 한다고 하는데 정말 아무것도 모르겠습니다ㅠㅠ >위에서는 계속 왜안되냐고 쪼기만 하시고 정말 답답해 죽겠습니다... >혹시 lenti가지고 실험하셨던 분이 있으시다면 그냥 지나치지 마시고 꼭 좀 도와주세요... 6well plate에 세포를 깔고 다음날 viral soup을 원액부터 1/10씩 희석하여 infection 시켜 줍니다. 그리고 다음날 부터 viral vector가 가지고 있는 selection marker를 이용하여 항생제로 세포를 죽입니다. 그러면 7일에서 10일 후면 콜로니가 형성 될 것입니다. 그 때 콜로니 숫자 곱하기 희석한 배율을 하면 titer가 나옵니다.