2006-05-23
org.kosen.entty.User@5ba49196
강효찬(taifun)
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혹시 RT-PCR를 위해서 kit를 사용하신 분들이 계시면, 추천 좀 해주세요.
그리고 혹시 인트론에서 만든 키트를 사용하신 경험이 있으신 분은 장단점도 부탁드립니다...
인트론은 한 키트로 96개를 실험할 수 있다고 하던데....ㅜㅜ
타카라 등등 많은 제품이 있던데....ㅜㅠ
- RT-PCR
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답변 1
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답변
허경선님의 답변
2006-05-29- 0
>혹시 RT-PCR를 위해서 kit를 사용하신 분들이 계시면, 추천 좀 해주세요. >그리고 혹시 인트론에서 만든 키트를 사용하신 경험이 있으신 분은 장단점도 부탁드립니다... >인트론은 한 키트로 96개를 실험할 수 있다고 하던데....ㅜㅜ >타카라 등등 많은 제품이 있던데....ㅜㅠ 안녕하세요. Intron rt-kit의 경우 님께서 찾아보신 96-well tube base의 premix가 lipophilize되어 있는 형태가 있고 아닌 형태도 있습니다. 님께서 찾으신 kit는 on-step kit로 template와 primer를 넣어주면 한번에 cDNA synthesis 후 PCR 되어 결과를 볼 수 있어 시간절약의 장점이 있습니다. 대신에 자신이 보고자 하는 gene과 internalize gene을 보려면 kit를 두배로 써야 한다는 단점이 있겠죠. 그리고 혹시나 조건이 안 맞아서 RT-PCR이 안 될경우도 다시 하려면 두배의 kit를 사용해야 한다는 단점이 있습니다. 가격은 다른 RT kit에 비해 저렴한 편입니다. 그리고 intron에 cDNA synthesis kit이 있는데, 먼저 cDNA synthesis 후 PCR을 하면 되니... 저의 경우 two-step을 권하겠습니다. bioneer의 경우 two-step RT premix kit가 있는데, cDNA synthesis kit이 intron처럼 96-well tube형태로 있습니다. Efficiency는 intron이나 별반 차이 없구요, 가격도 비슷합니다. 다카라의 경우도 비슷하구요. 그리고 gibco-BRL의 superscript kit나 promega RT kit가 있는데, 이들은 사용하는데 불편함은 있으나, taq polimerase가 high quality로 가격이 비쌉니다. --> 일단 kit를 결정하는데 있어서 다음의 사항을 고려해 보세요. 보고자 하는 gene의 expression을 관찰하는데 있어, 왠만큼 발현된다면, intron, bioneer, takara kit 모두 잘 됩니다. 하지만 많이 까다롭다면 좋은 taq polimerase를 사용해야 합니다. 그리고 앞서 말씀드린것처럼 one-step을 이용할지, cDNA synthesis kit와 PCR kit를 각각 구입하여 사용할지는 각각 홈페이지의 제품 설명을 통해서 꼼꼼히 살펴 본후 님의 실험목적에 맞게 선택하시는게 좋을 듯 싶네요.^^