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지식나눔

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DCFH-DA 프로토콜 좀 부탁드립니다.

2006-06-22 org.kosen.entty.User@4cd0c05a 조은재(cej1018)
  • 1
이번에 세포를 이용한 항산화 실험을 하려고 합니다. 논문에 보니 너무 간단하게 나와 있네요. 혹시 DCFH-DA 프로토콜 좀 얻을 수 없나해서 질문올립니다. 좋은 답변 부탁드립니다.
  • DCFH-DA
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답변 1
  • 답변

    민경진님의 답변

    2006-06-28
    • 0
    DCF사용해서 ROS측정하는거 말씀하시는거라 생각하고 답변하겠습니다. 전 confocal을 사용해서 일단 사진을 얻었습니다. cell을 dish에 깔고 pre warming된 DPBS로 2번 wash 합니다. DPBS를 넣어주고 DCF가 10 microM이 되도록 넣어주고 10min incubation합니다. DPBS로 3번 wash하고 (이때 깨끗하게 wash 하는것이 중요!!!) cell에 사용하는 media로 넣어준후 약물처리하고 confocal microscope로 사진 촬영하면 됩니다. 만약.... 약물처리 시간이 길다면, DCF incubation 이랑 약물처리순서를 반대로 하면 됩니다... 이정도로 이야기 할수 있는데, 더 궁금하신거 있으신가요? 실험 방법은 쉬운데.... 결과얻기는 어렵습니다... 현미경에서 빨리 결과를 얻어야지 , 시간을 끌면 basal이 올라갑니다....^^
    답변수정
    DCF사용해서 ROS측정하는거 말씀하시는거라 생각하고 답변하겠습니다. 전 confocal을 사용해서 일단 사진을 얻었습니다. cell을 dish에 깔고 pre warming된 DPBS로 2번 wash 합니다. DPBS를 넣어주고 DCF가 10 microM이 되도록 넣어주고 10min incubation합니다. DPBS로 3번 wash하고 (이때 깨끗하게 wash 하는것이 중요!!!) cell에 사용하는 media로 넣어준후 약물처리하고 confocal microscope로 사진 촬영하면 됩니다. 만약.... 약물처리 시간이 길다면, DCF incubation 이랑 약물처리순서를 반대로 하면 됩니다... 이정도로 이야기 할수 있는데, 더 궁금하신거 있으신가요? 실험 방법은 쉬운데.... 결과얻기는 어렵습니다... 현미경에서 빨리 결과를 얻어야지 , 시간을 끌면 basal이 올라갑니다....^^
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