지식나눔

과산화지질 생성 억제 측정시 (Linoleic acid 산화억제)

1. caffeic acid 1ml(0ug/ml-1000ug/ml)+ 리놀릭산 0.056ml+ 에탄올 2ml+ phosphate buffer 2ml = 40도씨 4시간 반응 2. 1번 반응물 0.5ml + 0.2ml (8%)SDS + 1.5ml (20%) Acetic acid + 1.5ml (0.8%) TBA 3. 100도씨 60분간 반응 4. 5000g 에서 10분동안 원심분리 5. 532nm에서 측정 다음과 같은 방법으로 caffeic acid의 저해율을 얻으려 합니다. 그러나 control(caffeic acid 0 ug/ml)값이 caffeic acid가 들어간 값보다 낮게 나옵니다. 제가 알기론 inhibition이 없을때 더 붉은 색을 띄는것으로 알고 있는데 제가 잘 못 알고 있는것입니까? 아님 실험방법상의 문제가 있는것입니까? 너무 급합니다. 몇번이고 반복실험을 해도 똑같은 결과가 나옵니다. 무엇이 문제 입니까?
  • 과산화지질 저해능
  • Linoleic acid
지식의 출발은 질문, 모든 지식의 완성은 답변! 
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
답변 1
  • 답변

    나영님의 답변

    다른 물질들로 TBARS 실험을 했는데요.. 확실하진 않지만 제 생각에는.. 1. caffeic acid의 불안정성... 즉, caffeic acid 가 고온에서 변색이 된다는것.. 2. control의 흡광도가 낮다.. 저같은 경우는 과산화 유도를 80도에서 6시간 이상 shaking 하면서 진행했습니다. 시간이 짧거나 온도가 낮으면, 흡광도가 낮아 효과를 측정하기가 어렵더군요.. >1. caffeic acid 1ml(0ug/ml-1000ug/ml)+ 리놀릭산 0.056ml+ 에탄올 2ml+ phosphate buffer 2ml = 40도씨 4시간 반응 > >2. 1번 반응물 0.5ml + 0.2ml (8%)SDS + 1.5ml (20%) Acetic acid + 1.5ml (0.8%) TBA > >3. 100도씨 60분간 반응 > >4. 5000g 에서 10분동안 원심분리 > >5. 532nm에서 측정 > >다음과 같은 방법으로 caffeic acid의 저해율을 얻으려 합니다. > >그러나 control(caffeic acid 0 ug/ml)값이 caffeic acid가 들어간 값보다 낮게 나옵니다. > >제가 알기론 inhibition이 없을때 더 붉은 색을 띄는것으로 알고 있는데 제가 잘 못 알고 있는것입니까? >아님 실험방법상의 문제가 있는것입니까? > >너무 급합니다. >몇번이고 반복실험을 해도 똑같은 결과가 나옵니다. >무엇이 문제 입니까? > >
    다른 물질들로 TBARS 실험을 했는데요.. 확실하진 않지만 제 생각에는.. 1. caffeic acid의 불안정성... 즉, caffeic acid 가 고온에서 변색이 된다는것.. 2. control의 흡광도가 낮다.. 저같은 경우는 과산화 유도를 80도에서 6시간 이상 shaking 하면서 진행했습니다. 시간이 짧거나 온도가 낮으면, 흡광도가 낮아 효과를 측정하기가 어렵더군요.. >1. caffeic acid 1ml(0ug/ml-1000ug/ml)+ 리놀릭산 0.056ml+ 에탄올 2ml+ phosphate buffer 2ml = 40도씨 4시간 반응 > >2. 1번 반응물 0.5ml + 0.2ml (8%)SDS + 1.5ml (20%) Acetic acid + 1.5ml (0.8%) TBA > >3. 100도씨 60분간 반응 > >4. 5000g 에서 10분동안 원심분리 > >5. 532nm에서 측정 > >다음과 같은 방법으로 caffeic acid의 저해율을 얻으려 합니다. > >그러나 control(caffeic acid 0 ug/ml)값이 caffeic acid가 들어간 값보다 낮게 나옵니다. > >제가 알기론 inhibition이 없을때 더 붉은 색을 띄는것으로 알고 있는데 제가 잘 못 알고 있는것입니까? >아님 실험방법상의 문제가 있는것입니까? > >너무 급합니다. >몇번이고 반복실험을 해도 똑같은 결과가 나옵니다. >무엇이 문제 입니까? > >
    등록된 댓글이 없습니다.