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Osteogenic differentiation

BM MSC를 이용해서 Osteogenic differentiation을 시키고 있습니다. 6well plate에 별도의 ECM없이 약 4x10^4 cells/well로 plating 후 Cambrex사에서 판매하는 osteogenic media로 배양했습니다. 2주전까지는 잘 분화되는 듯 보이다가 2주 전후로 분화중인 well의 cells만 벗겨지는 현상이 보입니다. 완전히 말린다고 할까요? 일반적으로 BM MSC의 osteogenic differentiation은 3주이상 배양하는 것으로 알려져 있는데, 벌써 두번째인데 이유가 뭔지 짐작으론 cell이 많아지면서 분화되는 중 벗겨지는 듯 싶지만 정확한 이유가 궁금합니다. 답을 알고계신분 좋은 답변 바랍니다. 급합니다.
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답변 1
  • 답변

    김성환님의 답변

    MC3T3-E1 세포를 이용하여 differentiation시키면 2주정도부터 mineralization이 생깁니다. 이때부터 배지교체 등등을 하게 되면 세포가 훌러덩(?) 벗겨지는 것을 관찰할 수 있는데 이는 mineralization이 생기면서 세포와 plate간의 접합력, 특히 boundary부분이 약해져서 그런 것이 아닌가 싶습니다. 즉 세포간의 결합력이 더욱 강해져서 boundary부분이 상대적으로 취약해졌다고 할 수 있죠. 정확한 내용에 대한 reference는 저도 아직 찾아보질 못했지만 개인적으론 이런 이유때문이 아닌가 싶습니다.
    MC3T3-E1 세포를 이용하여 differentiation시키면 2주정도부터 mineralization이 생깁니다. 이때부터 배지교체 등등을 하게 되면 세포가 훌러덩(?) 벗겨지는 것을 관찰할 수 있는데 이는 mineralization이 생기면서 세포와 plate간의 접합력, 특히 boundary부분이 약해져서 그런 것이 아닌가 싶습니다. 즉 세포간의 결합력이 더욱 강해져서 boundary부분이 상대적으로 취약해졌다고 할 수 있죠. 정확한 내용에 대한 reference는 저도 아직 찾아보질 못했지만 개인적으론 이런 이유때문이 아닌가 싶습니다.
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