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지식나눔

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Serum안의 virus capsid 를 깰 수 있는 방법??

2006-10-31 org.kosen.entty.User@50cfc812 오순진(ohorangi)
  • 1
HBV 환자의 serum 에서 purify kit 을 사용하지 않고 virus capsid를 깨서 virus DNA를 분리하는 방법을 찾고 있습니다. 좋은 정보 기다리겠습니다.
  • virus capsid
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답변 1
  • 답변

    맹필재님의 답변

    2006-11-01
    • 0
    >HBV 환자의 serum 에서 purify kit 을 사용하지 않고 virus capsid를 > >깨서 virus DNA를 분리하는 방법을 찾고 있습니다. > >좋은 정보 기다리겠습니다. > 우선 serum 내에 있는 virus particle을 얻은 후 virus DNA를 분리할 수 있습니다. 환자의 serum 에 polyethylene glycol(serum 부피의 1/10)을 첨가한 후, 10분 동안 10,000g의 속도로 원심분리 한다. 얻어진 virus pellet을 buffer 용액에 현탁한 후, SDS 와 proteinase 를 첨가하고 (1% SDS, 0.5mg/ml proteinase K 가 되도록), 섭씨 55도에서 2시간 반응한다. Phenol/chloroform을 첨가하여 extraction 한 후, aqueous 상등액을 얻고, virus DNA를 에탄올로 침전시킨 후 동결건조한다.
    답변수정
    >HBV 환자의 serum 에서 purify kit 을 사용하지 않고 virus capsid를 > >깨서 virus DNA를 분리하는 방법을 찾고 있습니다. > >좋은 정보 기다리겠습니다. > 우선 serum 내에 있는 virus particle을 얻은 후 virus DNA를 분리할 수 있습니다. 환자의 serum 에 polyethylene glycol(serum 부피의 1/10)을 첨가한 후, 10분 동안 10,000g의 속도로 원심분리 한다. 얻어진 virus pellet을 buffer 용액에 현탁한 후, SDS 와 proteinase 를 첨가하고 (1% SDS, 0.5mg/ml proteinase K 가 되도록), 섭씨 55도에서 2시간 반응한다. Phenol/chloroform을 첨가하여 extraction 한 후, aqueous 상등액을 얻고, virus DNA를 에탄올로 침전시킨 후 동결건조한다.
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