2006-12-05
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김은경(reiauska)
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시그마꺼 protease K 100mg 을 PBS 6ml 을 넣어서 5mg/300ul로 만들어서 -20도에서 보관을 했거든요.protease K를 처음에 녹일떄 투명했는뎀.... 한 2달이 지나자 불투명해졌어요. ㅠ.ㅠ, 그렇다고 침전은 없구요, e-tube 안에 있던 투명했던 것이 하얗게 되었어요..
어떻게 된것일까요? 이런 경우 계속 protease k를 쓸수 있어요?
제발 도와주세요...
-20도에 보관 가능하구요. 물에 녹이라고 했던데, 저번에 녹인사람이 pbs에 녹였길래 저두 그렇게 녹였거든요. 저번에꺼랑 동일한protease K이구요(카달로그 번호가 동일)
제발 도와주세요....
정령 다시 새로 사야하는 건가요???ㅜ.ㅜ
- protease K
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답변 1
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답변
전주홍님의 답변
2006-12-06- 0
사용하시는데에는 큰 무리가 없고 그냥 하시던 데로 사용하셔도 좋은 결과를 얻으실 겁니다. 효소활성은 잘 나타납니다. DNA prep에 사용하시는데 찜찜하시다면 Plasmid DNA + Restriction enzyme + proteinase K 넣고 DNA digestion 여부를 전기영동으로 판단해보면 쉽게 확인할 수 있습니다. proteinase K에 의해 Restriction enzyme이 쉽게 inactivation되기 때문에 agarose gel 전기영동으로 확인이 가능하죠... protease K가 워낙 stable한 효소이거든요... 잘아시겠지만 protease K는 일반적으로 metal ions, SDS, urea 하에서도 효소활성이 잘나타납니다. 오히려 SDS (2.0% 미만)와 urea (4 M 미만)의 농도에서 활성이 증가된다는 보고도 있습니다. pH도 4-12.5 사이에서 효소활성이 잘 나타나고 적정온도는 65도 입니다. >시그마꺼 protease K 100mg 을 PBS 6ml 을 넣어서 5mg/300ul로 만들어서 -20도에서 보관을 했거든요.protease K를 처음에 녹일？？ 투명했는뎀.... 한 2달이 지나자 불투명해졌어요. ㅠ.ㅠ, 그렇다고 침전은 없구요, e-tube 안에 있던 투명했던 것이 하얗게 되었어요.. >어떻게 된것일까요? 이런 경우 계속 protease k를 쓸수 있어요? >제발 도와주세요... >-20도에 보관 가능하구요. 물에 녹이라고 했던데, 저번에 녹인사람이 pbs에 녹였길래 저두 그렇게 녹였거든요. 저번에꺼랑 동일한protease K이구요(카달로그 번호가 동일) > > 제발 도와주세요.... >정령 다시 새로 사야하는 건가요???ㅜ.ㅜ