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lysis buffer for liver

수고 많으십니다.. liver 조직에서 단백질 추출할려고 하는데.. lysis buffer를 어떤걸 써야하나요...일반적으로 많이 쓰는것들...이 무엇인지? 제품화된 것 말고..조제해서 쓸 수 있는것 .. lysis buffer 조성좀 가르쳐 주세요... 그리고 참고적으로 웨스턴할려고 단백질 추출하는 것이고..호모게나이즈 할겁니다..
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답변 1
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    윤철희님의 답변

    일반적으로 가장 많이 쓰이는 버퍼는 RIPA buffer입니다.. 간조직을 적출하여 PBS를 사용해 충분히 혈액을 제거한 후에(물론 적혈구를 gradient로 제거를 해줄 수도 있습니다) 버퍼를 사용하여 extraction 하여주면 됩니다.. 물론 실험의 특성 상 cytoplasm, membrane protein, nucler protein으로 구분을 해 줄 경우에는 좀 다른 버퍼 구성을 사용하고 좀 더 많은 스텝이 요구되어집니다.. 요즘에는 KIT이 여러 회사에서 나오고 있습니다.. 아니고 직접 만들어 쓰실 거라면 몰큘라 실험 프로토콜등을 보면 나와 있고.. 아님 웹에서도 어렵지 않게 구하실 수 있을 겁니다. 좋은 실험 되세요.. >수고 많으십니다.. > >liver 조직에서 단백질 추출할려고 하는데.. > >lysis buffer를 어떤걸 써야하나요...일반적으로 많이 쓰는것들...이 무엇인지? > >제품화된 것 말고..조제해서 쓸 수 있는것 .. > >lysis buffer 조성좀 가르쳐 주세요... > >그리고 참고적으로 웨스턴할려고 단백질 추출하는 것이고..호모게나이즈 할겁니다.. >
    일반적으로 가장 많이 쓰이는 버퍼는 RIPA buffer입니다.. 간조직을 적출하여 PBS를 사용해 충분히 혈액을 제거한 후에(물론 적혈구를 gradient로 제거를 해줄 수도 있습니다) 버퍼를 사용하여 extraction 하여주면 됩니다.. 물론 실험의 특성 상 cytoplasm, membrane protein, nucler protein으로 구분을 해 줄 경우에는 좀 다른 버퍼 구성을 사용하고 좀 더 많은 스텝이 요구되어집니다.. 요즘에는 KIT이 여러 회사에서 나오고 있습니다.. 아니고 직접 만들어 쓰실 거라면 몰큘라 실험 프로토콜등을 보면 나와 있고.. 아님 웹에서도 어렵지 않게 구하실 수 있을 겁니다. 좋은 실험 되세요.. >수고 많으십니다.. > >liver 조직에서 단백질 추출할려고 하는데.. > >lysis buffer를 어떤걸 써야하나요...일반적으로 많이 쓰는것들...이 무엇인지? > >제품화된 것 말고..조제해서 쓸 수 있는것 .. > >lysis buffer 조성좀 가르쳐 주세요... > >그리고 참고적으로 웨스턴할려고 단백질 추출하는 것이고..호모게나이즈 할겁니다.. >
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