2007-09-26
org.kosen.entty.User@147e17ce
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제가 임의로 합성한 서열의 단백질을 발현 시키려 하는데 잘안됩니다.
되더라도.. inclusion body의 solubilization이 잘안되구요...sds이외에는 거의 안되는 거 같습니다. fusion partner를 붙여 발현시켜봐도 해결이 안나구요..
그래서 찾아보니 Takara에 pCOLD vector가 있다라구요..혹시나해서..
이런 vector 사용하시는 분은 분양좀 해주실 수 있나해서요..
구입하기에는 비용이 만만치가 않아서리..부탁드리겠습니다.
혹 사용하신다면 잘되는지도 알려주심 더욱감사하겠습니다.
- protein expression
- E. coli
- inclusion body
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 2
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답변
유용규님의 답변
2007-09-28- 0
저의 경우에는 독성단백질을 발현할 때에 사용한적이 있는데.... insoluble protein에대한 문제해결이 다른것보다 용이하다는 말을 들은적이 있어요 >제가 임의로 합성한 서열의 단백질을 발현 시키려 하는데 잘안됩니다. >되더라도.. inclusion body의 solubilization이 잘안되구요...sds이외에는 거의 안되는 거 같습니다. fusion partner를 붙여 발현시켜봐도 해결이 안나구요.. >그래서 찾아보니 Takara에 pCOLD vector가 있다라구요..혹시나해서.. >이런 vector 사용하시는 분은 분양좀 해주실 수 있나해서요.. >구입하기에는 비용이 만만치가 않아서리..부탁드리겠습니다. >혹 사용하신다면 잘되는지도 알려주심 더욱감사하겠습니다. -
답변
김미현님의 답변
2007-10-15- 0
>제가 임의로 합성한 서열의 단백질을 발현 시키려 하는데 잘안됩니다. >되더라도.. inclusion body의 solubilization이 잘안되구요...sds이외에는 거의 안되는 거 같습니다. fusion partner를 붙여 발현시켜봐도 해결이 안나구요.. >그래서 찾아보니 Takara에 pCOLD vector가 있다라구요..혹시나해서.. >이런 vector 사용하시는 분은 분양좀 해주실 수 있나해서요.. >구입하기에는 비용이 만만치가 않아서리..부탁드리겠습니다. >혹 사용하신다면 잘되는지도 알려주심 더욱감사하겠습니다. 이 vector도 inclusion body문제는 해결안될수도 있어요...그래서 말인데요... expression할때 ethanol을 첨가해서 25-30C에서 induction하면 해결될수도 있어요