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지식나눔

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기질에 대한 효소 활성측정에 관해 문의 드립니다.

2007-11-11 org.kosen.entty.User@4f49353b 김미경(vikiee7388)
  • 2
안녕하세요. lipase, esterase 종류의 활성 측정 방법을 문의 드립니다. 저는효소를 이용하여 고분자 물질의 degradation을 확인코자 하는데 제 전공분야는 생물분야가 아닌 공학 쪽이라서 여러 활성측정에 관한 논문을 봐도 실험하기에는 자세한 사항이 부족하여 이렇게 문의드립니다. 기본적으로는 p-nitrophenyl butyrate를 이용하여 이들의 가순분해 산물인 nitrophenol의 흡광도를 측정함으로서 활성치 정도를 알 수 있다는 정도만 파악됩니다. 그러나 여기서 어떻게 활성치를 알아내는지 자세한 실헙방법 및 계산방법을 문의 드리고자 합니다. 그리고 가장 궁금한 것은 기질이 p-NPB등의 물질이 아니라 플라스틱 같은 고분자 물질일 경우 이들의 대한 활성치를 측정하는 방법을 알고 싶습니다. 그리고 이들 효소의 활성 측정이 가능한 KIT set를 시약상 등을 통해 구매할 수 있는지 어떻게 사용하는ㅈ 알 고 싶습니다. 너무 기초적인 부분을 문의드린 것 같아 죄송합니다. 부탁드리겠습니다.
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답변 2
  • 답변

    조희영님의 답변

    2007-11-12
    • 0
    lipase나 elastase assay kit은 제품으로 많이 출시되어있음. Cayman, Calbiochem, Molecular probes (Invitrogen)등의 홈피에 들어가 보세요. 흡과이나 형광을 측정하는 제품이 많음. 그러나 효소와 기질을 따로 구매하여 실험하는 것이 더 경제적임. 활성치는 product의 흡광도-농도 calibration curve로 부터 구함. 즉 일정구간에서 calibration curve는 직선을 나타내므로 linear regression(쉽게 말해 직선을 그려 기울기과 절편을 추정)하여 이 직선에 효소반응으로 얻어진 흡광도를 넣으면 농도를 얻고 시간에 따른 농도변화로 부터 활성을 얻음. >안녕하세요. >lipase, esterase 종류의 활성 측정 방법을 문의 드립니다. >저는효소를 이용하여 고분자 물질의 degradation을 확인코자 하는데 >제 전공분야는 생물분야가 아닌 공학 쪽이라서 >여러 활성측정에 관한 논문을 봐도 실험하기에는 자세한 사항이 부족하여 이렇게 문의드립니다. > >기본적으로는 p-nitrophenyl butyrate를 이용하여 이들의 가순분해 산물인 nitrophenol의 흡광도를 측정함으로서 활성치 정도를 알 수 있다는 정도만 파악됩니다. >그러나 여기서 어떻게 활성치를 알아내는지 자세한 실헙방법 및 계산방법을 문의 드리고자 합니다. > >그리고 가장 궁금한 것은 기질이 p-NPB등의 물질이 아니라 >플라스틱 같은 고분자 물질일 경우 >이들의 대한 활성치를 측정하는 방법을 알고 싶습니다. > >그리고 이들 효소의 활성 측정이 가능한 KIT set를 시약상 등을 통해 구매할 수 있는지 어떻게 사용하는ㅈ 알 고 싶습니다. > >너무 기초적인 부분을 문의드린 것 같아 죄송합니다. >부탁드리겠습니다.
    답변수정
    lipase나 elastase assay kit은 제품으로 많이 출시되어있음. Cayman, Calbiochem, Molecular probes (Invitrogen)등의 홈피에 들어가 보세요. 흡과이나 형광을 측정하는 제품이 많음. 그러나 효소와 기질을 따로 구매하여 실험하는 것이 더 경제적임. 활성치는 product의 흡광도-농도 calibration curve로 부터 구함. 즉 일정구간에서 calibration curve는 직선을 나타내므로 linear regression(쉽게 말해 직선을 그려 기울기과 절편을 추정)하여 이 직선에 효소반응으로 얻어진 흡광도를 넣으면 농도를 얻고 시간에 따른 농도변화로 부터 활성을 얻음. >안녕하세요. >lipase, esterase 종류의 활성 측정 방법을 문의 드립니다. >저는효소를 이용하여 고분자 물질의 degradation을 확인코자 하는데 >제 전공분야는 생물분야가 아닌 공학 쪽이라서 >여러 활성측정에 관한 논문을 봐도 실험하기에는 자세한 사항이 부족하여 이렇게 문의드립니다. > >기본적으로는 p-nitrophenyl butyrate를 이용하여 이들의 가순분해 산물인 nitrophenol의 흡광도를 측정함으로서 활성치 정도를 알 수 있다는 정도만 파악됩니다. >그러나 여기서 어떻게 활성치를 알아내는지 자세한 실헙방법 및 계산방법을 문의 드리고자 합니다. > >그리고 가장 궁금한 것은 기질이 p-NPB등의 물질이 아니라 >플라스틱 같은 고분자 물질일 경우 >이들의 대한 활성치를 측정하는 방법을 알고 싶습니다. > >그리고 이들 효소의 활성 측정이 가능한 KIT set를 시약상 등을 통해 구매할 수 있는지 어떻게 사용하는ㅈ 알 고 싶습니다. > >너무 기초적인 부분을 문의드린 것 같아 죄송합니다. >부탁드리겠습니다.
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  • 답변

    장성재님의 답변

    2007-11-12
    • 0

    첨부파일

    일반적인 가수 분해 효소들의 측정법은 위에 조희영 박사님께서 설명해주셨으니 넘어가, 목적이신 듯한 생분해성 플라스틱 (바이오 폴리머)에 관한 자료를 첨부합니다. http://airlab.wkhc.ac.kr/acidrain/envdb/ham5/5-8.htm의 사이트에 가시면 원광보건대 대기오염 연구실에서 작성한 생분해성 플라스틱에 대한 간략히 설명된 자료가 있으니 참고하시길 바랍니다. 그리고, 특정 바이오 폴리머에 대한 분해 정도를 측정하는 것은 일반적인 가수분해 효소의 역가 측정법을 응용한 경우가 대부분이므로 타겟에 맞추어 선택하신 후 사용하시는 것이 좋을 듯 싶습니다. 즉, 관련 연구 논문을 검색하셔서 참고 하시는 것이 가장 빠른 방법입니다. biodegradable polymer로 검색하시면 많은 자료를 접하실 수 있습니다. 영문으로된 참고 자료도 첨부합니다.
    답변수정
    일반적인 가수 분해 효소들의 측정법은 위에 조희영 박사님께서 설명해주셨으니 넘어가, 목적이신 듯한 생분해성 플라스틱 (바이오 폴리머)에 관한 자료를 첨부합니다. http://airlab.wkhc.ac.kr/acidrain/envdb/ham5/5-8.htm의 사이트에 가시면 원광보건대 대기오염 연구실에서 작성한 생분해성 플라스틱에 대한 간략히 설명된 자료가 있으니 참고하시길 바랍니다. 그리고, 특정 바이오 폴리머에 대한 분해 정도를 측정하는 것은 일반적인 가수분해 효소의 역가 측정법을 응용한 경우가 대부분이므로 타겟에 맞추어 선택하신 후 사용하시는 것이 좋을 듯 싶습니다. 즉, 관련 연구 논문을 검색하셔서 참고 하시는 것이 가장 빠른 방법입니다. biodegradable polymer로 검색하시면 많은 자료를 접하실 수 있습니다. 영문으로된 참고 자료도 첨부합니다.
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