2007-12-11
org.kosen.entty.User@31518d96
이신애(image07)
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혈액에서 RNA을 추출하려고 하는데
아시다시피 샘플 추출 후 최단 시간안에 뽑아야 하나자요
그런데 샘플을 수집하는 곳이랑 가져와서 실험해야 하는 곳이 워낙 멀어서
적어도 5시간 이상은 유지를 시켜야 합니다
그래서 5시간이상 전혈에서 RNA를 안정화 시켜서 가지고 올 수 있는 방법에 대해 질문합니다.
그냥 trizol에 담아서 와야 하는건지.. 찾아봐도 혈액 추출후 몇시간 이내로만 하라고 되어있지
정확히 몇시간이 지나면 안된다는 말도 없고.. 얼린 혈액은 쓰지 말라고만 되어있고..
만약 trizol에 담아와야 하면 전혈 얼마에 trizol얼마나 넣어야 할까요
다른 방법이나 해보신 분이 있으면 좋은 정보 부탁드립니다
- RNA
- blood
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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김윤상님의 답변
2007-12-12- 0
Qiagen 에서 나오는 PAXgene Blood RNA System 이 좋기는 합니다만... 님의 상황에서 이런 kit을 사용하는 게 가능한 지 모르겠습니다. http://www.preanalytix.com/RNA.asp 거기에 포함된 tube를 사용하면 - 혈액을 뽑아 이곳에 보관하면 - 실온에서 3일간, 그리고 2-8 도에서 5일간 안정화시켜준다고 그러는데요... Ambion 에서 나온 RiboPure™-Blood 의 RNAlater도 비슷한 역할을 합니다. http://www.ambion.com/techlib/prot/fm_1928.pdf 혈액을 얻은 다음 RNAlater를 넣어주면, 실온에서 3일간, 얼리게 되는 경우 장기간 보관이 가능하답니다. Applied Biosystems의 Tempus™ Blood RNA Tubes 도 5일간 안정화시켜 준다고 하네요. http://www.appliedbiosystems.com/europe/biosystems/pdf/iss10/biosol_iss10_tempus.pdf 참조하세요. -
답변
윤철희님의 답변
2007-12-12- 0
저희 연구실이 사람, 동물 혈액을 다른 곳에서 가져와 면역세포 실험을 많이 합니다.. 꼭 RNA를 뽑아서 가져와야 한다고 생각하실 필요 없습니다. 혈액상태로 가져오면 혈액 내 세포들이 이상없이 잘 있거든요.. 5-8시간은 아무 문제 없습니다. 일반적으로 PBMC 상태에서는 4 C가 보관이 좋습니다. 하지만 전혈일때는 그냥 Room temp. 이면 됩니다.. 따라서 혈액을 운반한 후 배양을 하거나 RNA를 추출하여도 아무 문제 없습니다.. 좋은 실험 되시기 바랍니다.. >혈액에서 RNA을 추출하려고 하는데 >아시다시피 샘플 추출 후 최단 시간안에 뽑아야 하나자요 >그런데 샘플을 수집하는 곳이랑 가져와서 실험해야 하는 곳이 워낙 멀어서 >적어도 5시간 이상은 유지를 시켜야 합니다 >그래서 5시간이상 전혈에서 RNA를 안정화 시켜서 가지고 올 수 있는 방법에 대해 질문합니다. >그냥 trizol에 담아서 와야 하는건지.. 찾아봐도 혈액 추출후 몇시간 이내로만 하라고 되어있지 >정확히 몇시간이 지나면 안된다는 말도 없고.. 얼린 혈액은 쓰지 말라고만 되어있고.. >만약 trizol에 담아와야 하면 전혈 얼마에 trizol얼마나 넣어야 할까요 >다른 방법이나 해보신 분이 있으면 좋은 정보 부탁드립니다