2008-02-13
org.kosen.entty.User@6682359d
김영한(p0158)
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J androl 2003;24:59-66
이 논문에 나온 SCD test 에서
neutralizing and lysing sol. 2. 를 만드는 중임니다.
(0.4M Tris, 2M NaCl, 1% SDS, pH 7.5) <-- 이렇게 만드는데
열을 가하면 녹긴 하지만 실온에선 결정이 생겨 버립니다.
각각 따로 녹여서 섞어도 보았고,
Tris를 먼저 HCl로 pH를 맞추고도 녹여보았습니다.
Tris+NaCl 을 먼저 녹이고 따로 녹인 SDS를 넣으면 바로 결정이 생겨
버립니다.
논문에서는 상온에서 실험을 한다고 나와있는데
어찌 해야 할까요
꼭 좀 알려주세요
- NaCl
- SDS
- Tris
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답변 2
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답변
김정모님의 답변
2008-02-14- 0
SDS를 분말로 바로 녹이게 되면 이런 경우가 종종 발생합니다. SDS 농도가 높거나 아니면 상온에 보관하는데 주변 온도가 낮을 경우 많이 생기게 됩니다. 우선 조성에 보면 1% SDS로 되어 있으니 stock solution(10% 혹은 20% SDS)을 만드셔서 희석하시는 편이 좋을 듯 싶습니다. 녹이실때는 조금씩 분말 시약을 넣어 다 녹으면 조금씩 더 첨가하셔서 녹이시는 편이 잘 녹습니다. 가열을 해 녹이게 되면 아무래도 시약 자체가 식게되면 또 결정이 생길수 있습니다. 그래도 문제가 생기신다면 분말시약을 바꾸어 보시는 것도 한 방법인것 같습니다. 분말시약이 고운 가루 형태로 된것이 아무래도 잘 녹고 결정도 덜 생깁니다. 비늘 같이 생긴 분말 시약은 쉽게 결정이 생기더군요. >J androl 2003;24:59-66 > >이 논문에 나온 SCD test 에서 >neutralizing and lysing sol. 2. 를 만드는 중임니다. > >(0.4M Tris, 2M NaCl, 1% SDS, pH 7.5) <-- 이렇게 만드는데 >열을 가하면 녹긴 하지만 실온에선 결정이 생겨 버립니다. >각각 따로 녹여서 섞어도 보았고, >Tris를 먼저 HCl로 pH를 맞추고도 녹여보았습니다. >Tris+NaCl 을 먼저 녹이고 따로 녹인 SDS를 넣으면 바로 결정이 생겨 >버립니다. >논문에서는 상온에서 실험을 한다고 나와있는데 >어찌 해야 할까요 > >꼭 좀 알려주세요 > -
답변
안길홍님의 답변
2008-02-14- 0
논문 및 생물관련에 대하여서는 모르겠으나, 화학공학에서 사용하는 방법으로 한번 하여 보시기 바랍니다. 용량은 필요한 량으로 비율에 따라 조절하여 만드시기 바랍니다. 준비하여야 할 물질 (1) 1M Tris: Tris 121.1gr을 증류수 800ml에 투입한 후 HCl로 pH7.5로 조정. (2) 0.5M EDTA : Na2EDTA 186,1gr을 증류수 750ml에 투입하여 magnetic stirrer로 혼합하면서 약 23gr의 NaOH로 pH8.0으로 조정. (pH8.0이 되면서 EDTA가 용해됨) (3) 5M Nacl : NaCl 145gr을 증류수와 혼합하여 total volume을 500ml로 만듬.(교반하면서 가열하여 완전 용해되도록 함) (4) 10% SDS : SDS 10mg을 90ml 증류수에 혼합한후 온도를 68C까지 올려서 먼저 용해시키고,HCl 로 pH7.2로 조정. 이상을 상온으로 식고난 후 (1)에서 순차적으로 혼합함. 이때 과도한 교반속도는 SDS에서 거품이 많이 나므로 천천히 혼합함.