지식나눔

pectinase의 량을 pectin agar plate를 이용해서 clear zone으로 확인하고 싶은데 방법좀 갈켜주세여.

논문을 읽어봐도 마땅히 적용할수 있는것도 없구요.ㅡㅡ;; 그래서 아시는분 팁좀주십시요.ㅜㅜ
  • pectin
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답변 1
  • 답변

    장성재님의 답변

    예전에 질문을 올리셨던 분이군요. agar plate를 이용한 분해 효소의 역가 측정법은 상당히 오래된 방법으로 균주의 스크리닝 단계에서 많이 사용하는 방법입니다. clear zone의 크기를 비교하여 균주 선별하는 상대적인 효소 역가의 비교에는 적당하지만 절대적인 효소의 역가의 측정에는 표준 효소 (역가를 알고 있는)를 사용하여 정량을 해야만 합니다. (예전의 질문 시에 첨부해드린 colorimetirc analysis법을 사용) 미생물학 실험 교재 등에 자주 등장하는 전분 분해 효소나 단백질 분해 효소 등의 agar plate를 이용한 역가 측정법을 참고하셔서 탄소원을 pectin으로 사용하는 agar plate를 만드신 후 균체를 희석 도말하여 clear zone의 크기를 비교하시면 될 듯 싶습니다. 논문에 따라 차이는 있었지만, 기초 배지에 0.25% - 0.5% (w/v)으로 pectin을 넣으신 후 agar plate를 제작하여 사용하는 것으로 나와있더군요.
    예전에 질문을 올리셨던 분이군요. agar plate를 이용한 분해 효소의 역가 측정법은 상당히 오래된 방법으로 균주의 스크리닝 단계에서 많이 사용하는 방법입니다. clear zone의 크기를 비교하여 균주 선별하는 상대적인 효소 역가의 비교에는 적당하지만 절대적인 효소의 역가의 측정에는 표준 효소 (역가를 알고 있는)를 사용하여 정량을 해야만 합니다. (예전의 질문 시에 첨부해드린 colorimetirc analysis법을 사용) 미생물학 실험 교재 등에 자주 등장하는 전분 분해 효소나 단백질 분해 효소 등의 agar plate를 이용한 역가 측정법을 참고하셔서 탄소원을 pectin으로 사용하는 agar plate를 만드신 후 균체를 희석 도말하여 clear zone의 크기를 비교하시면 될 듯 싶습니다. 논문에 따라 차이는 있었지만, 기초 배지에 0.25% - 0.5% (w/v)으로 pectin을 넣으신 후 agar plate를 제작하여 사용하는 것으로 나와있더군요.
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