지식나눔

Roche Kpn1 enzyme 질문입니다.

Roche Kpn1 enzyme의 경우 사용하기전에 BSA를 넣으라고 하는데 왜 그런건가요? 혹시 아시는분 계신가요?? -_-;; 제가 요즘 vector 자를 때 Kpn1을 사용하는데 agarose gel 전기영동 상에서는 cut된것이 보였거든요.. 근데 그땐 BSA를 넣지 않고 잘랐는데 잘린것을 확인했는데 BSA를 넣은것 하고 차이가 나는 건가요?? 아시는분 답변 부탁드립니다..^^
  • kpn1
  • enzyme
  • bsa
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답변 1
  • 답변

    장성재님의 답변

    일반적으로 제한효소를 처리할 때 BSA를 넣어주는 이유는 소량의 제한효소를 처리할 때 발생할 수 있는 마이크로피펫의 팁이나 반응용기인 튜브의 벽면에 비특이적으로 효소가 결합하는 등 효소의 loss가 발생하기 쉬운 데 이를 최소화 하기 위해서 BSA를 사용합니다. 또한, 특정 제한효소의 경우 불안정한 경우가 있는데 이를 안정화시켜주는 역할을 하기도 합니다. 후자의 경우 BSA의 첨가는 긴 반응시간을 요구하는 경우에 특히 효소 단백질의 안정화에 기여한다고 합니다. 제조사의 각 제한효소에 대한 설명서나 홈페이지를 검색하시면 관련 정보를 쉽게 얻으실 수 있습니다.
    일반적으로 제한효소를 처리할 때 BSA를 넣어주는 이유는 소량의 제한효소를 처리할 때 발생할 수 있는 마이크로피펫의 팁이나 반응용기인 튜브의 벽면에 비특이적으로 효소가 결합하는 등 효소의 loss가 발생하기 쉬운 데 이를 최소화 하기 위해서 BSA를 사용합니다. 또한, 특정 제한효소의 경우 불안정한 경우가 있는데 이를 안정화시켜주는 역할을 하기도 합니다. 후자의 경우 BSA의 첨가는 긴 반응시간을 요구하는 경우에 특히 효소 단백질의 안정화에 기여한다고 합니다. 제조사의 각 제한효소에 대한 설명서나 홈페이지를 검색하시면 관련 정보를 쉽게 얻으실 수 있습니다.
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