2008-06-07
org.kosen.entty.User@4428f00f
윤진선(shin4537)
- 1
제가 siRNA를 Qiagen kit를 사용하여 transfection을 하는데요,
transfection이 잘 안 된 것 같습니다.
control siRNA에 Alexia488이 binding하구 있어서 형광현미경으로 확인을
해야 했는데요, 형광이 잘 안 보이더라구요.
kit에 제공되어있는 protocol 그대루 했는데, 어디서부터 문제가 있는
것인 지 확인을 할 수가 없습니다.
농도는 다른 논문들에서 나오는 농도루 했구요, 꽤 많이 넣었다구
생각이 들거든요.
고수님들의 조언이 절실히 필요합니다.
도움을 주세요,,
- transfection
- siRNA
지식의 출발은 질문, 모든 지식의 완성은 답변!
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
답변 1
-
답변
정철웅님의 답변
2008-06-12- 0
>제가 siRNA를 Qiagen kit를 사용하여 transfection을 하는데요, > >transfection이 잘 안 된 것 같습니다. > >control siRNA에 Alexia488이 binding하구 있어서 형광현미경으로 확인을 > >해야 했는데요, 형광이 잘 안 보이더라구요. > >kit에 제공되어있는 protocol 그대루 했는데, 어디서부터 문제가 있는 > >것인 지 확인을 할 수가 없습니다. > >농도는 다른 논문들에서 나오는 농도루 했구요, 꽤 많이 넣었다구 > >생각이 들거든요. > >고수님들의 조언이 절실히 필요합니다. > >도움을 주세요,, 보통 kit manual로 한다고 해서 그대로 나오지는 않습니다. control siRNA로 조건을 먼저 잡으시길 바랍니다. cell line에 따라 다르고 passage에 따라서도 효율이 차이가 날 수 있습니다. cell number와 siRNA 양을 2-3배 위 아래로 변화 시키면서 조건을 다시 잡아보시기 바랍니다.