2008-07-08
org.kosen.entty.User@59135e2e
이인태(biolit)
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최종 단백질 정제 후 잔류 DNA 측정 하려고 준비 중입니다.
제가 처음 하는거라 찾아봐도 잘 모르겠어서 질의하게 되었습니다.
SYBO green 이면 하면 된다고 아래에 답해주신 분이계신데요
Real Time-PCR에 이용하는 제품인가요?
이것을 이용해서 어떻게 진행하면 되는지요?
아시는 분들의 도움을 부탁드립니다.
즐거운 하루 되세요.
- DNA
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 2
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답변
이상후님의 답변
2008-07-08- 0
>최종 단백질 정제 후 잔류 DNA 측정 하려고 준비 중입니다. > >제가 처음 하는거라 찾아봐도 잘 모르겠어서 질의하게 되었습니다. > >SYBO green 이면 하면 된다고 아래에 답해주신 분이계신데요 >Real Time-PCR에 이용하는 제품인가요? > >이것을 이용해서 어떻게 진행하면 되는지요? >아시는 분들의 도움을 부탁드립니다. > > >즐거운 하루 되세요. > > SYBR Green I을 이용한 PCR의 실시간 모니터링은 target별로 특별한 형광 표식 probe를 준비할 필요가 없으며, 비용면에서도 저렴하다. 그러나 SYBR Green I은 서열 비특이적으로 double strand DNA에 결합하므로, 증폭 자체에 특이성이 요구되어 반응조건 검토가 매우 중요해지므로, 조건 검토는 주로 다음의 3 단계로 구성됩니다. ① Primer 설계 : Real Time 검출시에는 증폭산물 size가 100 ~ 300 bp가 되도록 설계하고 (최적 size는 100 ~150 bp). ② 충분한 template 양 (<30 ng)을 사용하여 가장 효율적으로 증폭하는 조건을 결정하고, ③ Template 희석계열을 이용하여 ②에서 결정한 최적 반응 조건에 따 라 검량선을 작성하고, 그 직선정도를 확인하고, 직선이 아닐 경우는 다시 조건을 검토하게 됩니다. -
답변
안길홍님의 답변
2010-01-29- 0
첨부파일
>최종 단백질 정제 후 잔류 DNA 측정 하려고 준비 중입니다.>>제가 처음 하는거라 찾아봐도 잘 모르겠어서 질의하게 되었습니다.>>SYBO green 이면 하면 된다고 아래에 답해주신 분이계신데요>Real Time-PCR에 이용하는 제품인가요?>>이것을 이용해서 어떻게 진행하면 되는지요?>아시는 분들의 도움을 부탁드립니다.>>>즐거운 하루 되세요. 첨부자료