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pGEX vector에서 발현된 GST는 bovine, equine, human 에서 분리된 GST와 특성이 같나요?

pGEX vector에서 발현된 GST는 bovine, equine, human 에서 분리된 GST와 특성이 같나요? pGEX 에서 발현된 GST에 대한 항체를 가지고있는데 이 항체로 bovine, equine, human 에서 분리된 GST를 detection 할 수있는지 궁굼해서 그렇습니다.
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답변 1
  • 답변

    장성재님의 답변

    pGEX vector에서 발현되는 GST는 Schistosoma japonicum (기생충) 유래입니다. 주로 pGEX vector를 이용하여 fusion 단백질 형태로 생산되는 재조합 단백질의 분리, 정제, 확인을 위해서 사용합니다. 항체의 경우도 Schistosoma japonicum의 GST를 면역원으로 사용하여 제조한 것들이며, 제조사에 따라서 GST 단백질 전체를 사용한 polyclonal Ab에서부터 부분 펩티드를 사용한 단일클론 항체에 이르기까지 다양합니다만, 포유류의 GST와 Schistosoma japonicum의 GST는 상당한 아미노산 서열에 차이를 보입니다 (상동성이 매우 낮음). 직접 테스트 해보지는 않았지만, 운이 좋아서 corss activity를 갖는 polyclonal Ab를 사용할 경우 Western blot으로 확인이 가능할 수도 있습니다만, 항체의 농도나 조건은 시약 제조업체에서 추천하는 조건과 큰 차이를 보일 수 있습니다. bovine, equine, human으로부터 분리한 GST를 확인하시고자 한다면, mammalian 유래의 GST (alpha, mu, pi.....)는 상동성이 크므로 pGEX용 항체가 아닌 별도의 항체를 구입하시길 권합니다. >pGEX vector에서 발현된 GST는 bovine, equine, human 에서 분리된 GST와 특성이 같나요? pGEX 에서 발현된 GST에 대한 항체를 가지고있는데 이 항체로 bovine, equine, human 에서 분리된 GST를 detection 할 수있는지 궁굼해서 그렇습니다.
    pGEX vector에서 발현되는 GST는 Schistosoma japonicum (기생충) 유래입니다. 주로 pGEX vector를 이용하여 fusion 단백질 형태로 생산되는 재조합 단백질의 분리, 정제, 확인을 위해서 사용합니다. 항체의 경우도 Schistosoma japonicum의 GST를 면역원으로 사용하여 제조한 것들이며, 제조사에 따라서 GST 단백질 전체를 사용한 polyclonal Ab에서부터 부분 펩티드를 사용한 단일클론 항체에 이르기까지 다양합니다만, 포유류의 GST와 Schistosoma japonicum의 GST는 상당한 아미노산 서열에 차이를 보입니다 (상동성이 매우 낮음). 직접 테스트 해보지는 않았지만, 운이 좋아서 corss activity를 갖는 polyclonal Ab를 사용할 경우 Western blot으로 확인이 가능할 수도 있습니다만, 항체의 농도나 조건은 시약 제조업체에서 추천하는 조건과 큰 차이를 보일 수 있습니다. bovine, equine, human으로부터 분리한 GST를 확인하시고자 한다면, mammalian 유래의 GST (alpha, mu, pi.....)는 상동성이 크므로 pGEX용 항체가 아닌 별도의 항체를 구입하시길 권합니다. >pGEX vector에서 발현된 GST는 bovine, equine, human 에서 분리된 GST와 특성이 같나요? pGEX 에서 발현된 GST에 대한 항체를 가지고있는데 이 항체로 bovine, equine, human 에서 분리된 GST를 detection 할 수있는지 궁굼해서 그렇습니다.
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