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지식나눔

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GST, MBP중 어느 것이 purification하는데 효율이 좋을까요??

2008-11-10 org.kosen.entty.User@13e41085 김은경(reiauska)
  • 1
안녕하세요.. 이번에 purification을 하려고 해요..GST와 MBP나 His 중에서 어느것이 더 효율이 좋게나올까요??? protocol이 여러개가 있는데 어느것을 해야할지 고민이예욤..ㅠ.ㅠ
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답변 1
  • 답변

    님의 답변

    2008-11-11
    • 0
    안녕하세요? GST MBP와 His system의 가장 큰 차이점은 pellet fraction에서 원하는 단백질은 얻을 수 있느냐 없느냐의 차이입니다. 즉, His system에서는 aggregate되는 단백질에서 Urea와 같은 denaturing chemical을 사용하여 solublization 시킬 수 있는 반면에 GST와 MBP는 soluble fraction의 단백질만을 얻어낼 수 있답니다. 원하는 유전자를 bacterial system에서 induction하였을때, soluble fraction인지 insoluble fraction인지 확인하셔야합니다. 그것에 따라 어떤 tagging을 쓸지 결정하기도 하니까요.. 그리고, 또한 GST와 MBP는 tag 자체가 큽니다. fussion된 단백질에 이 tagging이 영향을 미칠수도 있습니다.하지만 이system들은 thrombin과 같은 protease를 이용하여 tagging 을 떼어낼수 있다는 장점이있습니다. 도움이 되셨길 바랍니다. >안녕하세요.. >이번에 purification을 하려고 해요..GST와 MBP나 His 중에서 어느것이 더 효율이 좋게나올까요??? >protocol이 여러개가 있는데 어느것을 해야할지 고민이예욤..ㅠ.ㅠ
    답변수정
    안녕하세요? GST MBP와 His system의 가장 큰 차이점은 pellet fraction에서 원하는 단백질은 얻을 수 있느냐 없느냐의 차이입니다. 즉, His system에서는 aggregate되는 단백질에서 Urea와 같은 denaturing chemical을 사용하여 solublization 시킬 수 있는 반면에 GST와 MBP는 soluble fraction의 단백질만을 얻어낼 수 있답니다. 원하는 유전자를 bacterial system에서 induction하였을때, soluble fraction인지 insoluble fraction인지 확인하셔야합니다. 그것에 따라 어떤 tagging을 쓸지 결정하기도 하니까요.. 그리고, 또한 GST와 MBP는 tag 자체가 큽니다. fussion된 단백질에 이 tagging이 영향을 미칠수도 있습니다.하지만 이system들은 thrombin과 같은 protease를 이용하여 tagging 을 떼어낼수 있다는 장점이있습니다. 도움이 되셨길 바랍니다. >안녕하세요.. >이번에 purification을 하려고 해요..GST와 MBP나 His 중에서 어느것이 더 효율이 좋게나올까요??? >protocol이 여러개가 있는데 어느것을 해야할지 고민이예욤..ㅠ.ㅠ
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