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지식나눔

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sodium phospate buffer 만들껀데 ph 맞추는 법좀

2008-12-19 org.kosen.entty.User@20de9275 박재영(love8133)
  • 3
100mM sodium phosphate 1.5M ammonium sulfate (ph7.0) 를 만들려고 합니다. ph 맞추는 법좀.. phosphoric acid로 맞추면 되나요?
  • sodium phosphate
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답변 3
  • 답변

    이배훈님의 답변

    2008-12-19
    • 0
    >100mM sodium phosphate >1.5M ammonium sulfate (ph7.0) > >를 만들려고 합니다. >ph 맞추는 법좀.. > >phosphoric acid로 맞추면 되나요? 원하는 protocol에 따라 제조후 보통 1 N HCl 또는 1 N NaOH 용액으로 원하는 pH를 얻을 때까지 조금씩 떨어뜨리면 됩니다.
    답변수정
    >100mM sodium phosphate >1.5M ammonium sulfate (ph7.0) > >를 만들려고 합니다. >ph 맞추는 법좀.. > >phosphoric acid로 맞추면 되나요? 원하는 protocol에 따라 제조후 보통 1 N HCl 또는 1 N NaOH 용액으로 원하는 pH를 얻을 때까지 조금씩 떨어뜨리면 됩니다.
    박재영(love8133) 2008-12-19

    sodium phosphate나 ammoium sulfate 모두 Cl이 없는데 HCl 넣는다는게 맞나요?

    이배훈(lbh217) 2008-12-19

    HCl NaOH으로 보통 사용하는 것은 강산 강염기 때문에 아주 소량으로 원하는 pH에 근접할 수 있고, 또한 아주 소량을 넣기때문에 만든 buffer molarity를 크게 바뀌지 않게 때문인것 같습니다.
    Cl 이온은 크게 문제가 될것 같지 않습니다. pH를 낮추기위해 phosphoric acid를 사용해도 될것 같군요. 다만 가격과 산도(pKa)의 차이라 할까요? HCL (pKa=-4) Phosphoric acid (pKa1=2.12)

  • 답변

    박지훈님의 답변

    2008-12-21
    • 0
    >100mM sodium phosphate >1.5M ammonium sulfate (ph7.0) > >를 만들려고 합니다. >ph 맞추는 법좀.. > >phosphoric acid로 맞추면 되나요? phosphate buffer 종류는 mono- 또는 di-basic 으로 분류해서 나오는 걸로 알고 있는데요.. pH를 맞추어 버퍼를 만들때 보통 이 두가지를 섞는 방법을 씁니다. 염산이나 NaOH로 맞추어도 크게 상관은 없을 것 같지만 chloride나 sodium 도 염이기 때문에 민감한 실험을 할때는 영향을 미칠 수 있습니다. (예를 들어 conductivity-전도율 을 고려해야 하는 경우 등..) 따라서 sodium phosphate 두가지만으로 버퍼를 만드는 게 가장 이상적인데요 제 기억으론 dibasic이 pH가 높고 monobasic이 pH가 낮은걸로 기억하는데 이 두가지를 1M로 각각 준비한 뒤 두 용액의 배합으로 pH를 맞추어야 합니다. 구글에서 sodium phosphate buffer 등을 검색해보시면 원하시는 pH를 맞추시기 위한 배합등이 나와 있을 겁니다. 하지만 온도나 조건에 따라 그 배합이 조금 다를 수도 있으니 직접 pH를 측정해가면서 정확한 볼륨을 계산해가며 섞어주셔야 할 겁니다. 구글에 나와 있는 한 예를 보면 다음과 같습니다. make a higher concentration stock buffer (pH adjusted) and dilute to the concentrations you need (all from the same stock). for a 1M stock buffer: 39.0 ml 1M monobasic 61.0 ml 1M dibasic (adjust, as necessary, with 1M mono (to lower pH) or dibasic (to raise pH) stocks). final volume is not important except to ensure that you have enough for your dilutions. you can use lower concentration stocks if you want (many use 0.1 or 0.2M stocks) but we always found 1M to be convenient for all of our purposes. 버퍼 만드는게 상당히 까다로우니 계산 열심히 하셔야 할겁니다^^
    답변수정
    >100mM sodium phosphate >1.5M ammonium sulfate (ph7.0) > >를 만들려고 합니다. >ph 맞추는 법좀.. > >phosphoric acid로 맞추면 되나요? phosphate buffer 종류는 mono- 또는 di-basic 으로 분류해서 나오는 걸로 알고 있는데요.. pH를 맞추어 버퍼를 만들때 보통 이 두가지를 섞는 방법을 씁니다. 염산이나 NaOH로 맞추어도 크게 상관은 없을 것 같지만 chloride나 sodium 도 염이기 때문에 민감한 실험을 할때는 영향을 미칠 수 있습니다. (예를 들어 conductivity-전도율 을 고려해야 하는 경우 등..) 따라서 sodium phosphate 두가지만으로 버퍼를 만드는 게 가장 이상적인데요 제 기억으론 dibasic이 pH가 높고 monobasic이 pH가 낮은걸로 기억하는데 이 두가지를 1M로 각각 준비한 뒤 두 용액의 배합으로 pH를 맞추어야 합니다. 구글에서 sodium phosphate buffer 등을 검색해보시면 원하시는 pH를 맞추시기 위한 배합등이 나와 있을 겁니다. 하지만 온도나 조건에 따라 그 배합이 조금 다를 수도 있으니 직접 pH를 측정해가면서 정확한 볼륨을 계산해가며 섞어주셔야 할 겁니다. 구글에 나와 있는 한 예를 보면 다음과 같습니다. make a higher concentration stock buffer (pH adjusted) and dilute to the concentrations you need (all from the same stock). for a 1M stock buffer: 39.0 ml 1M monobasic 61.0 ml 1M dibasic (adjust, as necessary, with 1M mono (to lower pH) or dibasic (to raise pH) stocks). final volume is not important except to ensure that you have enough for your dilutions. you can use lower concentration stocks if you want (many use 0.1 or 0.2M stocks) but we always found 1M to be convenient for all of our purposes. 버퍼 만드는게 상당히 까다로우니 계산 열심히 하셔야 할겁니다^^
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  • 답변

    이배훈님의 답변

    2008-12-21
    • 0
    >100mM sodium phosphate >1.5M ammonium sulfate (ph7.0) > >를 만들려고 합니다. >ph 맞추는 법좀.. > >phosphoric acid로 맞추면 되나요? 0.1N phosphate buffer 만들기 Na2HPO4 (dibasic, pH 약8-9사이 )과 NaH2PO4 (monobasic pH 5부근) 방법 1. 0.2M Na2HPO4 와 0.2M NaH2PO4 를 준비한다.(NaOH HCl를 사용할 필요없죠) x mL 0.2M Na2HPO4 와 (50-x)0.2M NaH2PO4 를 섞으면 됩니다. pH 7.0 30.5 (50-30.5) PH 7.2 36.0 (50-36.0) pH 7.4 40.5 (50-40.5) pH 7.6 43.5 (50-43.5) PH 7.8 45.75 (50-47.35) 이중 pH 7.4 recipe를 사용하여 만든후 (부피50ml임) 추가적으로 증류수 50 ml를 넣어 dilute 시키면 0.1 M Phosphate buffer 가 됩니다. 방법 2. 11.3268g Na2HPO4(dibasic 0.08M)과 2.4302g NaH2PO4(monobasic,0.02M ) 를 증류수에 녹여 1 리터를 만들면0.1 M pH7.4 버퍼(0.08M+0.02M)가 됩니다. 경우에 따라 pH 가 벗어날 경우, 1M NaOH, HCl 또는 1M mono, dibasic 용액을 소량 첨가하여 맞추면 됩니다. (여기서 응용하여 10배를 곱하여 mono, dibasic를 첨가하면 1 M 의 pH 7.4 버퍼를 얻을 수 있죠) 기타 참고. 0.1 M Phosphate buffer saline를 만들고자 한다면 즉 세포와 같은 등장액을 만들고자 한다면, 세포 등장액은 약 0.15M (0.9% Nacl 용액과 같음)이기 때문에 0.1 phosphate 버퍼에 0.05M에 해당되는 NaCl를 첨가하면 됩니다.
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    >100mM sodium phosphate >1.5M ammonium sulfate (ph7.0) > >를 만들려고 합니다. >ph 맞추는 법좀.. > >phosphoric acid로 맞추면 되나요? 0.1N phosphate buffer 만들기 Na2HPO4 (dibasic, pH 약8-9사이 )과 NaH2PO4 (monobasic pH 5부근) 방법 1. 0.2M Na2HPO4 와 0.2M NaH2PO4 를 준비한다.(NaOH HCl를 사용할 필요없죠) x mL 0.2M Na2HPO4 와 (50-x)0.2M NaH2PO4 를 섞으면 됩니다. pH 7.0 30.5 (50-30.5) PH 7.2 36.0 (50-36.0) pH 7.4 40.5 (50-40.5) pH 7.6 43.5 (50-43.5) PH 7.8 45.75 (50-47.35) 이중 pH 7.4 recipe를 사용하여 만든후 (부피50ml임) 추가적으로 증류수 50 ml를 넣어 dilute 시키면 0.1 M Phosphate buffer 가 됩니다. 방법 2. 11.3268g Na2HPO4(dibasic 0.08M)과 2.4302g NaH2PO4(monobasic,0.02M ) 를 증류수에 녹여 1 리터를 만들면0.1 M pH7.4 버퍼(0.08M+0.02M)가 됩니다. 경우에 따라 pH 가 벗어날 경우, 1M NaOH, HCl 또는 1M mono, dibasic 용액을 소량 첨가하여 맞추면 됩니다. (여기서 응용하여 10배를 곱하여 mono, dibasic를 첨가하면 1 M 의 pH 7.4 버퍼를 얻을 수 있죠) 기타 참고. 0.1 M Phosphate buffer saline를 만들고자 한다면 즉 세포와 같은 등장액을 만들고자 한다면, 세포 등장액은 약 0.15M (0.9% Nacl 용액과 같음)이기 때문에 0.1 phosphate 버퍼에 0.05M에 해당되는 NaCl를 첨가하면 됩니다.
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