2009-01-13
org.kosen.entty.User@5ffaad54
원보령(wonby01)
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처음으로 마우스를 프렙하여 복부에서 피부를 절제하여 그것으로부터 표피를 얻으려 합니다. 저번에 피하지방을 제거하여 표피, 진피가 붙어 있는 것까지는 해보았는데 표피만을 얻으려 하는데 프로토콜을 알고 싶습니다. 자세하게 달아 주시면 너무나 감사드리께요~ ^^;
- ICR outbred
- epidermis
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 3
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답변
신재욱님의 답변
2009-01-13- 2
진피를 연골과 지방층으로 분리하고 0.5% 트립신이 담긴 배양접시에 진피를 바닥으로 향하게 한 다음 37℃에서 약 30-40분간(시간 조정)배양(반응) 시키면 표피가 진피로 부터 분리 되어 집니다.(트립신과 반응시간은 마우스 부위에 따라 약간의 조정이 필요합니다) -
답변
원보령님의 답변
2009-01-14- 0
답변 감사드립니다~ 제가 얻을 표피로 경피흡수실험을 하려고 하는 효소를 이용해서 표피와 진피를 분리시키면 표피에 영향이 많이 갈 것으로 예상이 됩니다. 단백질 분해 효소이다 보니... 괜찮을런지요? -
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신재욱님의 답변
2009-01-16- 0
트립신으로 표피의 세포를 분리하여 경피 흡수 시험은 가능하나 물질에 따라 다를 수 있습니다.(트립신이 세포에 대해 영향을 미칠 수도 있지만, 시간을 짧게 하면 세포보다는 접합부위를 떨어뜨리는 역할을 더 많이 하기 때문에...) 또한 트립신 처리 후에는 PBS로 많이 헹구어 내거나 inhibitor등으로 불활화 시킬 수 있습니다. 참고사항입니다만, 세포에 대한 흡수시험을 보실려면 cell line을 이용하여 in vitro 흡수시험을 하실 수도 있습니다. 간편하고 시간도 빠릅니다.