2009-03-06
org.kosen.entty.User@15550c20
박선영(pgene)
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안녕하세요.
BCA 정량을 하려고 합니다.
dialysis를 통해서 원래 샘플량이 25ml이었는데
33ml로 볼륨이 늘었습니다.
이것의 농도가 얼마나 되는지 궁금합니다.???
그리고 이것을 750, 500, 250ul/ml로 각각 BCA 정량을 하려고 하는데요.
그렇다면 샘플을 어떻게 믹스해야하는지
계산법과 량을 부탁드립니다.
자세한 답변 부탁드려요~
급합니다^^부끄부끄~
- protein
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 2
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답변
신재욱님의 답변
2009-03-06- 0
Test tube법/Microplate법과 enhanced test tube법이 있습니다. Enhanced test tube법은 단백질 농도가 낮다고 생각될때 사용되는 방법입니다. Standard 물질을 BSA를 희석하여 농도별로 사용하시고 시료를 적당량 희석하여 사용하셔서 standard curve에 대입하셔서 미지의 시료 농도를 확인하시면 됩니다. 자세한 것은 아래의 protocol을 확인하세요. http://abhayjere.com/Documents/BCA.pdf -
답변
신재욱님의 답변
2009-03-06- 0
Buffer에 Cu가 함유되어 있으면 안됩니다. BCA의 Cu와 반응하기 때문에 탈염하거나 단백질 용해한 buffer에 Cu가 있으면 단백질 농도와 다르게 정량될 수 있으니 반드시 확인하시고 시험하시기 바랍니다. http://www.ruf.rice.edu/~bioslabs/methods/protein/bca.html