2009-04-02
org.kosen.entty.User@785dd999
이유원(dreamway0)
- 3
안녕하세요.
다음과 같이 primer를 design하였습니다.
GC% Tm
Fw : 5’GAATTCGAGGCACTCACCATGG 3’ 54.5%, 58.2℃
Rv:: 5’GAATTCGCTTGAGCTCTCTAGA 3’ 45.5%, 54.1℃
앞쪽의 GAATTC는 EcoRI site로 pGEM T east vector와 다른 cloning vector에
cloning하기 위해 임의로 붙인겁니다.
주위에서 듣기론 EcoRI site앞에 임의로 6개정도 염기를 붙여야한다는 말도 있는데,
위와 같이 primer design해도 되는지요.
답변부탁드리겠습니다. 감사합니다^^
- enzyme
- primer
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 3
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답변
유용규님의 답변
2009-04-02- 0
일전에 Legionella pneumophila vacJ 유전자 클로닝을 진행할 때 절단효소자리를 붙인 primer를 사용해서 실험을 했었는데요.... 저는 그냥 절단효소자리만 붙여서 했는데.. 잘됐었습니다 >안녕하세요. >다음과 같이 primer를 design하였습니다. > GC% Tm >Fw : 5’GAATTCGAGGCACTCACCATGG 3’ 54.5%, 58.2℃ >Rv:: 5’GAATTCGCTTGAGCTCTCTAGA 3’ 45.5%, 54.1℃ > >앞쪽의 GAATTC는 EcoRI site로 pGEM T east vector와 다른 cloning vector에 >cloning하기 위해 임의로 붙인겁니다. >주위에서 듣기론 EcoRI site앞에 임의로 6개정도 염기를 붙여야한다는 말도 있는데, >위와 같이 primer design해도 되는지요. >답변부탁드리겠습니다. 감사합니다^^ > > -
답변
전정용님의 답변
2009-06-30- 0
T vector에 삽입하실거라면 상관없습니다. pcr의 결과 양쪽 끝에 모두 A 가 붙어 있기 때문에 cloning 자체가 잘되구요 이후에 e-site도 살아있기 때문에 실험할때 문제없을 겁니다. >안녕하세요. >다음과 같이 primer를 design하였습니다. > GC% Tm >Fw : 5’GAATTCGAGGCACTCACCATGG 3’ 54.5%, 58.2℃ >Rv:: 5’GAATTCGCTTGAGCTCTCTAGA 3’ 45.5%, 54.1℃ > >앞쪽의 GAATTC는 EcoRI site로 pGEM T east vector와 다른 cloning vector에 >cloning하기 위해 임의로 붙인겁니다. >주위에서 듣기론 EcoRI site앞에 임의로 6개정도 염기를 붙여야한다는 말도 있는데, >위와 같이 primer design해도 되는지요. >답변부탁드리겠습니다. 감사합니다^^ > > -
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DELETED님의 답변
2010-01-05- 0
>안녕하세요. >다음과 같이 primer를 design하였습니다. > GC% Tm >Fw : 5’GAATTCGAGGCACTCACCATGG 3’ 54.5%, 58.2℃ >Rv:: 5’GAATTCGCTTGAGCTCTCTAGA 3’ 45.5%, 54.1℃ > >앞쪽의 GAATTC는 EcoRI site로 pGEM T east vector와 다른 cloning vector에 >cloning하기 위해 임의로 붙인겁니다. >주위에서 듣기론 EcoRI site앞에 임의로 6개정도 염기를 붙여야한다는 말도 있는데, >위와 같이 primer design해도 되는지요. >답변부탁드리겠습니다. 감사합니다^^ > > Re:전혀 문제없습니다.